子宮肌瘤中垂體腫瘤轉(zhuǎn)化基因-1和堿性成纖維細(xì)胞生長因子表達(dá)的研究.pdf

1、目的：檢測子宮平滑肌瘤細(xì)胞和周圍正常子宮肌層細(xì)胞中垂體腫瘤轉(zhuǎn)化基因-1(PTTG-1)和堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bmGF)的表達(dá)水平，并分析兩者的關(guān)系，探討其在子宮肌瘤發(fā)生、發(fā)展中的作用，從而為臨床非手術(shù)治療子宮肌瘤提供新思路。 方法：體外原代培養(yǎng)人子宮平滑肌瘤細(xì)胞和周圍正常子宮肌層細(xì)胞并傳代，免疫細(xì)胞化學(xué)SABC法進(jìn)行細(xì)胞學(xué)鑒定。采用逆轉(zhuǎn)錄.聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法檢測培養(yǎng)細(xì)胞中PTTG-1mRNA和bFGFmRNA的

2、表達(dá)，并分析bFGF干預(yù)對體外培養(yǎng)子宮平滑肌瘤細(xì)胞中的PTTG-1mRNA表達(dá)的量效關(guān)系和時效關(guān)系。 結(jié)果： (1)成功培養(yǎng)了人子宮平滑肌瘤細(xì)胞和周圍正常子宮肌層細(xì)胞，并且經(jīng)免疫細(xì)胞化學(xué)鑒定證實(shí)。 (2)子宮肌瘤細(xì)胞中bFGFmRNA的表達(dá)水平(1.220±0.032)顯著高于周圍正常子宮肌層細(xì)胞(1.125±0.048)，且差異有顯著性(P<0.05)。 (3)子宮肌瘤細(xì)胞中PTTG-1mRNA的表達(dá)水

3、平(1.093±0.036)顯著高于周圍正常子宮肌層細(xì)胞(0.497±0.093)，差異有顯著性(P<0.001)；而在肌瘤或肌層細(xì)胞中PTTG-1mRNA的表達(dá)水平分別在增殖期(1.087±0.025，0.557±0.070)和分泌期(1.100±0.050，0.4374-0.078)比較均無顯著差異(P>0.05)。 (4)不同濃度bFGF對子宮肌瘤細(xì)胞干預(yù)，提示bFGF不同濃度干預(yù)的子宮肌瘤細(xì)胞PTTG-1 mRNA表達(dá)有

4、差別，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；不同濃度兩兩比較發(fā)現(xiàn)，隨著濃度的增高，其表達(dá)逐漸增加。未加藥組(1.113±0.015)與加藥組比較，差異均有顯著性(P<0.05)；加5ng/mL(1.180±0.020)與加10ng/mL、50ng/mL濃度組比較差異亦均有顯著性(P<0.05)；同樣加10ng/mL(1.240±0.043)與加50ng/mL(1.303±0.025)比較差異顯著，有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。 (5

5、)不同時間bFGF對子宮肌瘤細(xì)胞干預(yù)，提示不同作用時間bFGF干預(yù)下，子宮肌瘤細(xì)胞中PTTG-1mRNA的表達(dá)不同，同樣不同濃度作用下其表達(dá)亦不同，兩者差異顯著，均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，且時間和濃度之間存在交互作用(P<0.01)。進(jìn)一步進(jìn)行單因素方差分析提示：bFGF未干預(yù)組的子宮肌瘤細(xì)胞，在各個不同時間點(diǎn)，PTTG-1mRNA表達(dá)差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。而bFGF干預(yù)組的子宮肌瘤細(xì)胞，隨著時間的增加，PTTG-1

6、mRNA表達(dá)升高，組間比較差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。不同時間點(diǎn)兩兩比較發(fā)現(xiàn)：bFGF干預(yù)后48h、60h明顯高于36h和24h，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，而干預(yù)后36h(1.127±0.021)與24h(1.120±0.020)比較無顯著性差異(P>0.05)，48h(1.173±0.021)與60h(1.213±0.015)比較有顯著差異(P<0.05)；從而提示：bFGF干預(yù)后的子宮肌瘤細(xì)胞，隨著時間的增加，PT

7、TG-1mRNA表達(dá)逐步升高，且分別在干預(yù)后48h、60h差別有顯著性。 結(jié)論： (1)bFGF作為一種重要的生長因子，其在子宮肌瘤細(xì)胞中的高表達(dá)，提示可能通過促進(jìn)子宮肌瘤的血管形成和刺激子宮肌瘤細(xì)胞的增殖等多種環(huán)節(jié)促進(jìn)子宮肌瘤的發(fā)展。 (2)PTTG-1在子宮肌瘤細(xì)胞中的表達(dá)明顯高于正常子宮肌層細(xì)胞，提示：PTTG-1基因的異常表達(dá)可能與子宮肌瘤的發(fā)生有關(guān)。在月經(jīng)周期的增殖期肌瘤或鄰近肌層細(xì)胞中PTTG-1mR