膠原基復合組織修復材料的研制及應用基礎研究.pdf

1、本課題選擇具有很好細胞黏附作用的膠原和具有促進細胞遷移、黏附和增生作用的透明質(zhì)酸鈉為原材料，將二者復合，制備成具有多層結(jié)構的膠原膜，使其具有隔膜和促進組織再生的雙重功能。通過對其的安全性評價，動物實驗及臨床病例使用情況的考察，為臨床提供一種新型的引導組織再生材料。 具體研究工作如下： 1.工型膠原、透明質(zhì)酸鈉為主材料，經(jīng)過氧化、預冷凍、冷凍干燥、化學交聯(lián)等制備工藝，制備了一種一層是單一組分、結(jié)構致密的膠原層、另一層為結(jié)構

2、疏松的膠原與透明質(zhì)酸鈉混合物的雙層結(jié)構復合材料，并進行理化性能表征。 2.按照GB/T16886(IS010993)系列標準等對所研制的復合材料進行了系統(tǒng)的安全性評價研究。評價內(nèi)容包括：細胞毒實驗、致敏實驗、皮內(nèi)刺激實驗、急性全身毒性實驗、溶血實驗、熱原實驗、植入實驗、無菌實驗、沙門氏菌誘變性實驗(Ames實驗)、小鼠骨髓細胞微核實驗、中國倉鼠卵巢癌(CHL)細胞染色體畸變實驗。 3.建立肌腱損傷模型，將膠原/膠原-透明

3、質(zhì)酸鈉雙層復合材料用于損傷修復，通過組織病理學方法考察其肌腱組織損傷修復的隔膜作用，及選擇性地引導內(nèi)源性肌腱細胞向受損的部位附著、增生和促進組織修復的功能。 4.由腭裂和外傷、腫瘤等造成的腭部軟硬組織缺損，目前臨床采用的局部黏骨膜瓣等的轉(zhuǎn)移來關閉缺損間隙，手術整復方法存在一定的不足；本實驗在獲得制品臨床實驗批準文件后，探討該材料對腭部軟組織的引導再生修復作用。 5．選用膠原/膠原-透明質(zhì)酸鈉雙層結(jié)構復合材料作為血管組織工

4、程支架材料，并在支架上種植血管平滑肌細胞、血管內(nèi)皮細胞，通過光鏡、掃描電鏡，觀察細胞與支架材料的融合及生長情況，研究支架材料的細胞相容性，探索該復合材料在組織工程血管構建中作為支架材料的可能性。 實驗結(jié)果：所制備的膠原/膠原-透明質(zhì)酸鈉復合材料具有兩層結(jié)構特點，二層結(jié)構疏松、另一層較為致密；雙層結(jié)構結(jié)合緊密，膠原和透明質(zhì)酸鈉形成了有效的復合，理化指標結(jié)果符合體內(nèi)植入物要求；系統(tǒng)的安全性評價結(jié)果顯示復合材料細胞毒符合要求，無溶血作

5、用，無皮內(nèi)刺激反應、無致敏反應、無急性全身毒性反應、無熱原反應、植入實驗符合體內(nèi)植入物反應指標、無菌、無遺傳毒性。材料具有良好的生物相容性。 進一步的動物實驗結(jié)果顯示：材料植入后，組織反應符合要求；由于存在內(nèi)源性和外源性修復兩種修復機制，本實驗條件下，復合材料起到了隔膜作用，減少外源性修復的參與，防止肌腱粘連形成，并對肌腱損傷有引導再生效果。實驗結(jié)果也提示通過引導組織再生技術可能可以用于一些肌腱損傷的修復治療。進一步對腭部軟組織