雷帕霉素眼液抑制兔角膜新生血管的實驗研究.pdf

1、目的：觀察雷帕霉素眼液抑制堿燒傷誘導(dǎo)的兔角膜新生血管生長的實驗效果,研究角膜新生血管增生與炎癥細(xì)胞浸潤、血管內(nèi)皮生長因子的表達(dá)、CD34的表達(dá)之間的關(guān)系,從而初步探討雷帕霉素眼液抑制角膜新生血管的機制及其在眼表應(yīng)用的安全性。 方法：48只成年健康新西蘭白兔,排除眼部疾病,右眼堿燒傷制成新生血管模型。隨機分成四組,A組(0.1％雷帕霉素眼液),B組(0.5％雷帕霉素眼液),C組(1％雷帕霉素眼液),D組(賦形劑對照組),每日點眼四

2、次。術(shù)后左氧氟沙眼液每日3次滴眼預(yù)防感染。手術(shù)當(dāng)天及隔日觀測角膜混濁、溶解情況和新生血管生長并測量長度。堿燒傷后不同時間點(7、14天)處死實驗動物取下角膜,HE染色分析角膜組織病理變化,對角膜內(nèi)浸潤的炎性細(xì)胞進(jìn)行計數(shù),行CD34、VEGF免疫組化檢測,計數(shù)CD34標(biāo)記下新生血管密度,應(yīng)用病理圖像分析儀分析VEGF表達(dá)的灰度值。 結(jié)果：堿燒傷后各組角膜混濁均明顯,第7天差異無統(tǒng)計學(xué)意義；隨時間延長對照組角膜混濁、溶解加重,第14

3、天A、D組各出現(xiàn)一例角膜穿孔,B、C組的角膜混濁較前減輕,潰瘍部分修復(fù),前房積膿已吸收,第14天治療組B、C組與對照組角膜混濁及角膜溶解差異有統(tǒng)計學(xué)意義。裂隙燈觀察24小時見角膜緣血管網(wǎng)充盈,第3d可見角膜緣有新生血管向透明角膜生長,第7d至11d角膜新生血管生長旺盛,面積增加,第11d后B、C組CNV面積增長趨于穩(wěn)定。治療組新生血管面積在各時間點上均低于對照組,且治療組濃度越高新生血管面積越小,其中各時間點B、C組與對照組差異有統(tǒng)計學(xué)

4、意義,A組與對照組差異無統(tǒng)計學(xué)意義；B、C組在7天、9天、11天、14天的角膜新生血管生長面積差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。B、C組炎癥細(xì)胞計數(shù)、新生血管密度及VEGF表達(dá)均小于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。各組CNV面積與角膜炎性細(xì)胞數(shù)及VEGF表達(dá)呈正相關(guān)。 結(jié)論：一定濃度的雷帕霉素具有明顯的抑制堿燒傷后角膜炎癥反應(yīng)和新生血管的作用,為堿燒傷后角膜新生血管治療提供了安全有效的方法。角膜堿燒傷后大量炎癥細(xì)胞浸潤和VEGF表達(dá)增強,推測炎癥細(xì)