經(jīng)外膜緩釋雷帕霉素抑制兔移植血管內(nèi)膜增生的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：建立兔腎下腹主動(dòng)脈移植血管模型，并經(jīng)血管外膜給予雷帕霉素，研究移植血管病理學(xué)形態(tài)改變及α-actin、vWf、PCNA、p27kil在移植血管中的表達(dá)及其與血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)增殖的關(guān)系，探討雷帕霉素抑制移植血管再狹窄的作用機(jī)制，及經(jīng)血管外膜給藥的可行性。
　　 方法：健康雄性新西蘭大耳白兔36只，體重2.5～3.0kg，隨機(jī)分為A、B、C、D、E、F6組，每組6只，分別構(gòu)建去活性同種異體腹主動(dòng)脈移植模型及PTFE人

2、造血管腹主動(dòng)脈移植模型，血管吻合完成后各組給予不同處理。A組：去活性同種異體腹主動(dòng)脈移植組，移植血管不給予任何處理；B組：去活性同種異體腹主動(dòng)脈移植，在移植血管外膜及吻合口周圍涂抹配制好的20％pluronicF-127多聚凝膠0.5ml;C組：去活性同種異體腹主動(dòng)脈移植，在移植血管外膜及吻合口周圍涂抹攜帶雷帕霉素0.5mg的pluronicF-127多聚凝膠0.5ml;D組：PTFE人造血管腹主動(dòng)脈移植組，移植血管不給予任何處理；E組

3、：PTFE人造血管腹主動(dòng)脈移植，在移植血管外膜及吻合口周圍涂抹配制好的20％pluronicF-127多聚凝膠0.5ml;F組：PTFE人造血管腹主動(dòng)脈移植，在移植血管外膜及吻合口周圍涂抹攜帶雷帕霉素0.5mg的pluronicF-127多聚凝膠0.5ml。術(shù)后4周獲取移植血管，組織形態(tài)學(xué)方法觀察移植血管內(nèi)膜增生情況，計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)測(cè)量移植血管內(nèi)膜及中膜厚度，并計(jì)算內(nèi)膜增生程度（內(nèi)膜/中膜），免疫組化SP法檢測(cè)移植血管α-actin

4、、vWf、PCNA和p27kip1的表達(dá)。采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((-x)±s)表示。
　　 結(jié)果：1．成功構(gòu)建去活性同種異體腹主動(dòng)脈移植模型及PTFE人造血管腹主動(dòng)脈移植模型。2．術(shù)后1月，組織形態(tài)學(xué)觀察及計(jì)算機(jī)圖像分析發(fā)現(xiàn)，A組、B組較C組內(nèi)膜增生明顯，D組、E組較F組內(nèi)膜增生明顯，差異有顯著性(P＜0.05)。3.彈力纖維染色（Weigert氏間苯二酚品紅染色法）：去活性

5、移植血管術(shù)后4周仍可見完整的彈力纖維染色，移植血管彈力纖維及其它各層結(jié)構(gòu)保存完整。4．α-actin免疫組化觀察結(jié)果：增生的血管內(nèi)膜均可見α-actin陽(yáng)性表達(dá)，類似于血管平滑肌α-actin陽(yáng)性表達(dá)，證實(shí)增生的血管內(nèi)膜于最表層細(xì)胞層下表達(dá)平滑肌活性。5．vWf免疫組化觀察結(jié)果：移植后血管內(nèi)膜不同程度增生，最表層細(xì)胞呈單層排列，可見vWf陽(yáng)性著色，證實(shí)增生的內(nèi)膜最表層為單層排列的血管內(nèi)皮細(xì)胞。6．PCNA、p27kipl免疫組化觀察結(jié)果

6、：均為胞核著色，陽(yáng)性細(xì)胞呈棕黃色。各組移植血管增生的內(nèi)膜均可見不同程度的陽(yáng)性表達(dá)。7．α-actin和PCNA的表達(dá)，C組與F組分別較A、B組與D、E組明顯降低，差異有顯著性(P＜0.05)。p27kipl的表達(dá)，C組與F組分別較A、B組與D、E組明顯增多，差異有顯著性（P＜0.05）。A組與B組、D組與E組之間各組數(shù)據(jù)比較無(wú)顯著差異性（P＞0.05）。
　　 結(jié)論：1．經(jīng)甲醛處理的去活性同種異體血管可有效保存血管的組織結(jié)構(gòu)，并