胰腺癌細胞MIA PaCa-2趨化因子表達與CCL25-CCR9促細胞增殖侵襲的相關研究.pdf

1、胰腺癌是惡性度極高的惡性腫瘤之一，患者發(fā)現(xiàn)時多屬晚期，僅有10％-15％有手術切除的機會，5％-7.5％能根治。但是它術后復發(fā)率高，預后差，5年生存率僅為5％左右。胰腺癌的治療面臨如下難題：患者發(fā)現(xiàn)晚，手術切除幾率小；病情發(fā)展快，易于出現(xiàn)局部浸潤及遠處轉移；對放化療均不敏感。趨化因子是一類促炎多肽細胞因子的超家族，是能使細胞發(fā)生趨化運動的小分子細胞因子。近年來，有研究證實趨化因子能促進腫瘤細胞增殖、侵襲、遷移。但具體哪些趨化因子在胰腺癌

2、發(fā)展過程中發(fā)揮作用尚不得知。 研究目的： (1)使用cDNA基因芯片篩選出與胰腺癌細胞MIA PaCa-2侵襲轉移相關的的趨化因子及受體。 (2)采用單克隆抗體阻斷趨化因子及其受體的相互作用，觀察胰腺癌細胞的侵襲轉移能力的變化，在此基礎上明確阻斷趨化因子及其受體相互作用應用于臨床防治胰腺癌的可行性。 研究方法： 建立裸鼠的原位胰腺癌模型，將早期與晚期的腫瘤行趨化因子及受體的cDNA芯片檢測，篩選出

3、在胰腺癌病情發(fā)展中發(fā)揮作用的趨化因子及其受體；再通過免疫組化，RT-PCR，real-time PCR，Western Blot等方法進行驗證；另一方面，通過MTT實驗，流式細胞儀檢測細胞周期變化來驗證此趨化因子對胰腺癌細胞的促增殖作用，通過transwell實驗來驗證此趨化因子對胰腺癌細胞的趨化、促侵襲、促遷移作用，并運用此趨化因子受體的單克隆抗體阻斷趨化因子與受體之間的相互作用后，再觀察其對胰腺癌細胞上述作用的變化。 研究結

4、果： (1)建成裸鼠原位胰腺癌模型。 (2)通過cDNA基因芯片篩選出晚期胰腺癌高表達的趨化因子及其受體CCL25/CCR9，運用免疫組化，RT-PCR，real-time PCR，Western Blot等方法均證實其在晚期腫瘤標本中表達明顯增強。 (3)證實CCL25對胰腺癌細胞有促增殖，促侵襲，促遷移作用。采用anti-CCR9阻斷后，此種作用明顯減弱。 結論： 晚期MIA PaCa-2胰腺