COX-2、MMP-14和胰腺癌細(xì)胞增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移的關(guān)系研究.pdf

1、目的：
　　通過(guò)測(cè)定不同濃度的環(huán)氧合酶-2抑制劑塞來(lái)昔布對(duì)胰腺癌細(xì)胞增殖、侵襲、遷移能力以及對(duì)環(huán)氧合酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）、基質(zhì)金屬蛋白酶14（matrix metalloproteinase14，MMP-14）的蛋白表達(dá)影響來(lái)探討 COX-2抑制劑塞來(lái)昔布對(duì)胰腺癌的作用及相關(guān)作用機(jī)制。
　　方法：
　　1.體外培養(yǎng)人胰腺癌細(xì)胞系 PANC-1細(xì)胞；
　　2.分別用0（無(wú)）、20（

2、低）、60（中）、100（高）μmol/L四個(gè)塞來(lái)昔布濃度對(duì) PANC-1細(xì)胞進(jìn)行不同時(shí)間（24、48和72h）處理，MTT比色法檢測(cè)細(xì)胞的增殖能力，Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)和劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的侵襲能力和遷移能力，酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定（EILISA）法檢測(cè) COX-2和 MMP-14的蛋白表達(dá)情況；
　　3.數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　結(jié)果：
　　1. MTT結(jié)果顯示不同濃度的塞來(lái)昔布作用24、48和72h后 PANC-1

3、細(xì)胞的增殖能力下降，隨著塞來(lái)昔布濃度的增加，抑制作用逐漸增強(qiáng)，且隨著塞來(lái)昔布作用時(shí)間的延長(zhǎng)，抑制作用也逐漸加強(qiáng)，抑制作用呈時(shí)間和濃度依賴性(P<0.05)；
　　2. Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示不同濃度的塞來(lái)昔布作用24h后 PANC-1細(xì)胞的侵襲能力下降，穿過(guò)基質(zhì)膠的細(xì)胞個(gè)數(shù)分別為300.654±12.558、271.041±10.569、184.003±10.865和92.667±7.567(F=237.182，P<0

4、.05)，呈濃度依賴性；
　　3.劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示不同濃度的塞來(lái)昔布作用24h后 PANC-1細(xì)胞的遷移能力下降，相對(duì)遷移距離分別為11.400±0.959、9.511±1.110、5.856±0.778和2.844±0.416(F=59.516，P<0.05)，呈濃度依賴性；
　　4.正常 PANC-1細(xì)胞呈梭形或多角形，狀態(tài)良好，細(xì)胞形態(tài)學(xué)提示不同濃度的塞來(lái)昔布作用24h后 PANC-1細(xì)胞逐漸變圓、皺縮并開(kāi)始出現(xiàn)死細(xì)胞

5、；
　　5. ELISA結(jié)果提示不同濃度的塞來(lái)昔布作用24h后胰腺癌細(xì)胞中 COX-2和 MMP-14的蛋白表達(dá)水平相應(yīng)降低，均呈濃度依賴性，COX-2蛋白表達(dá)水平分別為0.876±0.023、0.682±0.027、0.505±0.022和0.384±0.019(F=262.537，P<0.05)；MMP-14蛋白表達(dá)水平分別為7.955±0.297、7.031±0.178、6.072±0.209、和5.047±0.216(F=

6、89.247，P<0.05)；
　　6. PANC-1細(xì)胞內(nèi) COX-2和 MMP-14的蛋白表達(dá)具有顯著正相關(guān)性(r=0.873，P<0.05)。
　　結(jié)論：
　　1. COX-2抑制劑塞來(lái)昔布以濃度梯度、時(shí)間梯度的形式減弱人胰腺癌細(xì)胞系 PANC-1的增殖能力，以濃度梯度的形式減弱人胰腺癌細(xì)胞系 PANC-1的侵襲及遷移能力；
　　2. COX-2抑制劑塞來(lái)昔布抑制 COX-2表達(dá)后，可能通過(guò)下調(diào) MMP-1