JNK通過(guò)抑制胰島素信號(hào)通路介導(dǎo)了高糖和軟脂酸誘導(dǎo)的胰島β細(xì)胞凋亡.pdf

1、2型糖尿病發(fā)病與患者體內(nèi)的高血糖和高血脂密切相關(guān)，體內(nèi)長(zhǎng)期高血糖和高血脂能夠誘導(dǎo)胰島β細(xì)胞和各種外周組織中產(chǎn)生內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激以及氧化應(yīng)激，從而造成胰島β細(xì)胞功能障礙和外周組織胰島素抵抗。胰島β細(xì)胞功能障礙是2型糖尿病發(fā)生的必要條件,胰島β細(xì)胞凋亡是造成胰島素分泌能力絕對(duì)下降的重要因素，因而β細(xì)胞凋亡在2型糖尿病發(fā)病的機(jī)制中起著重要的作用?，F(xiàn)有證據(jù)表明內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與氧化應(yīng)激通過(guò)激活c-Jun氨基端激酶(c-Jun NH2-terminal Ki

2、nase，JNK)，從而抑制胰島素生物合成和干擾胰島素作用通路，因此JNK在胰島β細(xì)胞功能障礙和凋亡以及胰島素抵抗中起著關(guān)鍵作用，然而JNK通過(guò)哪些下游信號(hào)通路以誘導(dǎo)β細(xì)胞凋亡，目前還不清楚。 本研究以小鼠胰島瘤細(xì)胞（Min6）和大鼠原代胰島β細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)材料，研究了JNK信號(hào)通路在介導(dǎo)高濃度葡萄糖和飽和脂肪酸（軟脂酸）誘導(dǎo)胰島β細(xì)胞凋亡中的可能機(jī)理。結(jié)果顯示，高糖和軟脂酸能顯著誘導(dǎo)胰島β細(xì)胞凋亡的發(fā)生。采用Western Blo

3、t技術(shù)分析細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標(biāo)志物PERK和eIF2α的磷酸化水平，發(fā)現(xiàn)在高糖和軟脂酸處理下，這兩者的磷酸化水平顯著上升，從而驗(yàn)證了高糖和軟脂酸能誘導(dǎo)胰島β細(xì)胞發(fā)生內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激。通過(guò)檢測(cè)胰島β細(xì)胞中JNK的磷酸化水平，發(fā)現(xiàn)高糖和軟脂酸能激活胰島β細(xì)胞JNK活性。本實(shí)驗(yàn)還采用JNK特異抑制劑(SP600125)處理胰島β細(xì)胞，檢測(cè)了JNK是否能通過(guò)磷酸化胰島素受體底物(Insulin Receptor Substrate-1，IRS-1)上Se

4、r307位點(diǎn)而使胰島素信號(hào)通路受阻。結(jié)果顯示，高糖和軟脂酸能誘導(dǎo)胰島β細(xì)胞IRS-1的Ser307位點(diǎn)磷酸化，而JNK特異抑制劑能有效抑制IRS-1的Ser磷酸化，說(shuō)明高糖和軟脂酸通過(guò)JNK依賴方式誘導(dǎo)了胰島β細(xì)胞IRS-1 Ser磷酸化，從而抑制了胰島素信號(hào)通路。已有研究顯示，IRS-1突變體的小鼠中胰島β細(xì)胞數(shù)量和體積均下降，出現(xiàn)了凋亡。因此我們的實(shí)驗(yàn)可以得出，JNK信號(hào)通路可能通過(guò)抑制胰島素信號(hào)通路從而介導(dǎo)了高糖和軟脂酸誘導(dǎo)的胰島