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文檔簡(jiǎn)介
1、目的：觀察高葡萄糖和高軟脂酸聯(lián)合應(yīng)用對(duì)人血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的作用效果，并探討其機(jī)制。 方法：高糖與高軟脂酸單獨(dú)及聯(lián)合作用于人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 (human umbilical vein endothelial cells，HUVECs)48小時(shí)，應(yīng)用Annexin V/PI雙染流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率，Hoechst33342熒光染色觀察凋亡形態(tài)學(xué)變化，高壓液相色譜聯(lián)合質(zhì)譜檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)神經(jīng)酰胺含量，分光光度法檢測(cè)半胱天冬氨酸特異性蛋白
2、酶-3(Cysteinyl aspartate specific protease-3，Caspase-3)活性。 結(jié)果：高糖與高軟脂酸單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用均可導(dǎo)致HUVECs出現(xiàn)凋亡的形態(tài)學(xué)變化。兩者聯(lián)合應(yīng)用時(shí)的凋亡率高于各自單用(P<0.05)。細(xì)胞內(nèi)神經(jīng)酰胺含量在高糖與高軟脂酸單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用時(shí)均較對(duì)照組升高(P<0.05)，聯(lián)合應(yīng)用時(shí)升高最為明顯(P<0.05)。神經(jīng)酰胺合成酶抑制劑myriocin能顯著降低高糖與高軟脂酸聯(lián)合應(yīng)
3、用導(dǎo)致的細(xì)胞凋亡率(P<0.05)。Caspase-3活性在高糖與高軟脂酸單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用時(shí)均較對(duì)照組升高，聯(lián)合應(yīng)用時(shí)升高最為明顯(P<0.05)。Caspase-3特異性抑制劑zDEVD-fmk能顯著降低高糖與高軟脂酸聯(lián)合應(yīng)用導(dǎo)致的細(xì)胞凋亡率(P<0.05)。神經(jīng)酰胺合成酶抑制劑myriocin能顯著抑制高糖與高軟脂酸聯(lián)合應(yīng)用導(dǎo)致的Caspase-3活性改變(P<0.05)。 結(jié)論：高糖、高軟脂酸聯(lián)合應(yīng)用能協(xié)同誘導(dǎo)人血管內(nèi)皮細(xì)胞
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