2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、研究目的:本課題旨在建立一種功能化磁性納米四氧化三鐵顆粒(Fe<,3>O<,4>-MNPs)攜載阿霉素(ADM)以及Fe<,3>O<,4>-MNPs共聚合ADM和漢防己甲素(Tet)的藥物制備方法,考察聚合溫度、聚合時(shí)間、藥球比對(duì)載藥的影響;研究攜載ADM的Fe<,3>O<,4>-MNPs(Fe<,3>O<,4>-MNPs-ADM)以及共聚合ADM和Tet的Fe<,3>O<,4>-NPs(Fe<,3>O<,4>-MNPs-ADM-Tet

2、)對(duì)人慢性粒細(xì)胞白血病急性紅白血病變細(xì)胞株K562及其耐藥細(xì)胞株K562/A02的作用,在蛋白質(zhì)和基因水平初步探討應(yīng)用Fe<,3>O<,4>-MNPs和Tet協(xié)同逆轉(zhuǎn)K562/A02細(xì)胞對(duì)阿霉素耐藥的機(jī)理。開(kāi)發(fā)新型耐藥逆轉(zhuǎn)劑,為臨床治療提供新策略和理論基礎(chǔ)。 研究方法:(1)采用機(jī)械吸附聚合法在4℃、37℃下以不同濃度Fe<,3>O<,4>-MNPs(V/V:0.05, 0.1,0.2,0.4)和一定濃度的ADM(50 μmol

3、/l)(不同藥球比)以及不同濃度Fe<,3>O<,4>-MNPs(V/V:0.05, 0.1,0.2,0.4)和一定濃度的ADM(50 μmol/l)、Tet(10 μmol/l) (不同藥球比)分別聚合24h、48h。(2)溴化3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑(MTT)法檢測(cè)兩種細(xì)胞分別與在不同聚合溫度、聚合時(shí)間、藥球比條件下的的聚合物Fe<,3>O<,4>-MNPs-ADM以及Fe<,3>O<,4>-MNPs-A

4、DM-Tet孵育48小時(shí)后的生存率,計(jì)算細(xì)胞抑制率。(3)熒光顯微鏡檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組K562/A02細(xì)胞內(nèi)ADM濃度。 (4)應(yīng)用流式細(xì)胞儀測(cè)定各實(shí)驗(yàn)組K562/A02細(xì)胞細(xì)胞膜上P-gp數(shù)量的表達(dá)。(5)采用半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組K562/A02細(xì)胞細(xì)胞多藥耐藥基因(mdrl基因)mRNA表達(dá)水平。 結(jié)果:(1)隨著Fe<,3>O<,4>-MNPs濃度增加,F(xiàn)e<,3>O<,4>-MNPs-ADM以及Fe<,3>O

5、<,4>-MNPs-ADM-Tet對(duì)兩種細(xì)胞K562和K562/A02的細(xì)胞抑制率均提高,聚合在4℃、48h時(shí)的細(xì)胞抑制率分別高于37℃、24h。①對(duì)于K562細(xì)胞:隨著Fe<,3>O<,4>-MNPs濃度的增加,F(xiàn)e<,3>O<,4>-MNPs-ADM以及Fe<,3>O<,4>-MNPs-ADM-Tet對(duì)K562細(xì)胞抑制率均逐漸增強(qiáng),呈直線相關(guān);聚合條件在4℃,24h的細(xì)胞抑制率強(qiáng)于37℃,24h的細(xì)胞抑制率。②對(duì)于K562/A02細(xì)

6、胞:隨著Fe<,3>O<,4>-MNPs濃度的增加,細(xì)胞抑制率增強(qiáng)但不呈直線相關(guān);聚合條件在37℃,48h的細(xì)胞抑制率強(qiáng)于37℃,24h的細(xì)胞抑制率;在37℃,24h聚合條件下通過(guò)熒光顯微鏡所測(cè)得的細(xì)胞內(nèi)ADM熒光強(qiáng)度值增強(qiáng),不呈直線相關(guān)。(2)隨著Fe<,3>O<,4>-MNPs濃度增加,F(xiàn)e<,3>O<,4>-MNPs攜載ADM以及Fe<,3>O<,4>-MNPs共聚合ADM和Tet與K562/A02的作用后,細(xì)胞內(nèi)ADM的熒光強(qiáng)度

7、增加,但其之間不成線性關(guān)系與MTT法所反映的細(xì)胞存活率的變化一致。(3)Tet能夠降低K562/A02細(xì)胞膜P-gp表達(dá),下調(diào)mdrl mRNA水平。(4)攜載Tet的Fe<,3>O<,4>-MNPs能夠增強(qiáng)這種基因的下調(diào),具有協(xié)同作用。但是不能降低P-gp表達(dá)的數(shù)量。結(jié)論:(1)可通過(guò)機(jī)械吸附法攜載水溶性藥物ADM、共聚合ADM和Tet兩藥,聚合過(guò)程具有顯著的溫度、時(shí)間依賴特性。(2)單獨(dú)攜載ADM或Tet以及共聚合兩藥的Fe<,3>

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