嗅鞘細(xì)胞移植和L-NNA對大鼠脊髓半橫斷后受損傷背核神經(jīng)元存活及其軸突再生的影響.pdf

1、研究目的：本實驗旨在觀察嗅鞘細(xì)胞(OECs)和L-NNA聯(lián)合作用對大鼠脊髓半橫斷損傷后背核神經(jīng)元存活及其軸突再生的影響。 研究方法：取SD雌性大鼠20只，體重200±20g，右側(cè)T11脊髓半橫斷后分四組處理：(1)對照組：脊髓半橫斷，損傷處移植浸有DMEM/F12培養(yǎng)液5μl的明膠海綿，術(shù)后每日腹腔注射生理鹽水；(2)OECs組：損傷處移植浸有OECs懸液5μl的明膠海綿，術(shù)后每日腹腔注射生理鹽水；(3)L-NNA組：損傷處移植

2、浸有DMEM/F12培養(yǎng)液5μl的明膠海綿，術(shù)后每日腹腔注射L-NNA(20mg/kg)；(4)OECs+L-NNA組：損傷處移植浸有OECs懸液5μl的明膠海綿，術(shù)后每日腹腔注射L-NNA(20mg/kg)。5組動物于術(shù)后26d在T9脊髓處注射熒光金，第30d被灌注取材，L1脊髓作連續(xù)冰凍橫切片(片厚30μm)，NADPH-d組織化學(xué)染色加中性紅復(fù)染，10×40倍鏡下計數(shù)L1脊髓背核存活神經(jīng)元數(shù)包括其分類計數(shù)，NOS表達(dá)情況以及背核有

3、無被熒光金標(biāo)記的神經(jīng)元。T8～T12脊髓作縱切片(片厚25μm)，分別做NGFRP75、NF、LN、CSPG免疫熒光染色及損傷區(qū)HE染色，觀察移植細(xì)胞存活遷移情況以及損傷區(qū)與周圍宿主整合情況。 研究結(jié)果：①OECs組、L-NNA組L1背核神經(jīng)元存活數(shù)均高于對照組，且分類計數(shù)顯示這兩組對脊髓大、中、小神經(jīng)元存活均有促進(jìn)作用，而OECs+L-NNA組的促存活作用最顯著。②OECs組和OECs+L-NNA組L1損傷區(qū)可見NF陽性纖維，