小腸粘膜下層材料的制備及相關實驗研究.pdf

1、研究目的：探索建立前置處理-超聲結合化學處理的方法制備小腸粘膜下層，并依次從組織學、化學試劑殘留量測定、細胞毒性、組織相容性、組織修復功能驗證等方面評價制備的小腸粘膜下層生物學性能。
　　研究方法：采用超聲生物技術，結合胰酶、SDS試劑，處理經過機械刮除小腸漿膜、肌層、粘膜層等前置處理的小腸粘膜下層；將樣品用固定劑固定后，在光學顯微鏡和真空掃描電子顯微鏡下觀察并比較脫細胞處理前后小腸粘膜下層膠原結構；采用亞甲基藍-分光光度法檢測小

2、腸粘膜下層材料殘留的SDS含量；體外培養(yǎng)L929細胞，制備材料浸提液，采用MTT法計算細胞相對增殖率，判定材料的細胞毒性；大鼠皮下埋入材料，通過觀察局部反應評價制備的SIS材料的組織相容性；建立大鼠腹壁缺損模型，以脫細胞真皮基質為對照，比較兩組材料在大體觀察、粘連評分、組織學觀察方面差異，評價小腸粘膜下層對腹壁缺損的修復能力。
　　研究結果：光學顯微鏡和真空掃描電子顯微鏡下觀察，制備的SIS材料無細胞殘留成分，基質成分未發(fā)生明顯變

3、化；采用亞甲基藍-分光光度法檢測材料清洗液中SDS含量輕微，對人體無副作用；細胞毒性實驗顯示，制備的SIS材料細胞毒性評價為1級，符合體內植入性醫(yī)用材料要求；皮下埋入實驗顯示，術后8周制備的SIS材料基本上降解完畢，膠原纖維結構不可見，幾乎全部被機體組織包裹、吸收，新生成的纖維結構纖細、松散、平型排列。小腸粘膜下層修復組織缺損術后24周觀察，材料膠原纖維全都被機體組織包裹、吸收，被平行或交錯分布的纖維結締組織替代，形成了成熟的肉芽組織，