VEGF對大鼠正畸牙牙周組織改建的影響.pdf

1、隨著社會經(jīng)濟的發(fā)展和生活水平的提高，人們對美的要求也越來越高，同時錯牙合畸形的危害也漸漸受到重視，渴望矯治的患者也在與日俱增，尤其是成年人。口腔正畸學的發(fā)展一定程度上解決了錯牙合畸形造成的口頜系統(tǒng)的形態(tài)和功能異常，滿足了人們對美的追求，但是由于正畸矯治時間較長或難度較大，許多患者往往不能堅持而放棄治療，國內(nèi)外學者為此作了許多相關研究。血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是一類

2、促進血管形成的細胞因子，具有廣泛的生物學作用，可調(diào)節(jié)成骨細胞和破骨細胞的分化及功能活性，與骨改建過程關系密切。近年來應用細胞因子作用于牙周功能細胞控制正畸牙齒移動，促進牙周組織改建，有研究表明，VEGF、整合素均參與了正畸牙牙周組織的改建；但有關二者在正畸牙牙周組織改建中的相互調(diào)節(jié)作用目前未見報道。 目的：觀察不同濃度的重組人血管內(nèi)皮生長因子(recombinant human vasoularendothelial growt

3、h factor,rhVEGFi)和重組鼠血管內(nèi)皮生長因子抗體(recombinant ratvasoular endothelial growth factor antibody,rranti—VEGF)對SD大鼠正畸牙牙周組織中整合素αv、β3(integrin alpha<,v>,beta<,3>)表達的影響，探討VEGF與整合素在牙周組織改建中的相互作用機制，為正畸臨床矯治提供相應的理論依據(jù)。 方法，在SD大鼠左側上頜第

4、一磨牙與上切牙之間安放正畸裝置，施力50g，建立大鼠上頜磨牙向近中移動的動物模型。將55只模型大鼠按注射的藥物不同隨機分為VEGF、anti-VEGF抗體和對照組三大組，分別為25只、25只、5只。其中VEGF組和anti-VEGF抗體組又根據(jù)注射藥物濃度不同各自分為0.1、0.5、1、1.5、2μg/ml和0.1、0.5、1、5、10μg/ml 5個亞組，分別在加力后的每隔兩天在左側上頜第一磨牙頰側牙齦粘膜下0.1、0.5、1、1.5

5、、2μg/ml濃度的rhVEGF0.1ml，anti-VEGF抗體組中的5小組，分別在加力后的每日在相同部位注射0.1，0.5、1、5、10μg/ml濃度的rranti-VEGF抗體0.1ml，對照組注射等量的滅菌磷酸鹽緩沖鹽水(Phosphate-buffered saline,PBS)。第十天處死大鼠。分別于實驗前后稱量大鼠體重并取正畸牙模型，在石膏模型上測量第一與第二磨牙兩牙的近中舌側溝間的距離。取左上頜第一磨牙及其牙周組織進行眥

6、染色行組織學觀察和破骨細胞計數(shù)，用免疫組織化學和原位雜交方法觀測整合素αv、β3在牙周組織功能細胞中的表達變化。 結果： 1．VEGF組：①牙齒移動距離測量：與對照組比較，各組牙齒移動距離都大于對照組，且濃度低于0.5μg/ml時移動距離隨VEGF濃度增高而增大，0.5μg/ml組達到最大值，差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，當濃度大于0.5μg/ml時移動距離隨VEGF濃度增高而減少，其他四組均無統(tǒng)計學差異(P>0.0

7、5)：②組織學改變及破骨細胞計數(shù)：與對照組比較，各濃度組壓力側破骨細胞都增多，以0.5μg/ml組最多，并且0.5μg/ml、1μg/ml和1.5μg/ml組其增加都有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，牙周的骨組織以吸收為主：0.1μg/ml、2μg/ml組的破骨細胞比對照組多，0.1μg/ml組有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，而2陷，ml組增加不明顯(P>0.05)；③整合素表達：整合素αv、β3隨VEGF濃度增大呈拋物線形表達，當VEGF為

8、1μg/ml時整合素αv、β3的表達到達峰值，比其表達值增高有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。VEGF濃度低于1μg/ml時整合素αv、β3的表達隨VEGF濃度的增大而增強，當VEGF濃度高于1μg/ml時，整合素αv、β3的表達隨VEGF濃度的增大而減弱。④各組動物處死時體重均比實驗前輕，但各組間差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 2．a(chǎn)nti-VgGF抗體組：①牙齒移動距離測量：與對照組比較，1μg/ml組的移動距離最小，當an

9、ti-VEGF抗體濃度低于1μg/ml時，牙齒移動距離隨anti-VEGF抗體濃度增高而減少，當anti-VEGF抗體濃度高于1μg/ml時，牙齒移動距離隨anti-VEGF抗體濃度增高而增大，各組移動距離都比對照組小，有統(tǒng)計學差異(P<0.01)。②組織學改變及破骨細胞計數(shù)：1μg/ml組壓力側的破骨細胞最少，與對照組比較P<0.01，提示牙周骨組織的吸收受到明顯抑制：其他各小組的減少都無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。③整合素表達：牙周

10、組織整合素αv、β3的表達隨anti-VEGF抗體濃度增加也呈拋物線狀，0.5μg/ml組為最低值，與對照組相比顯著減小(P<0.01)。在濃度小于0.5μg/ml的anti-VEGF抗體作用下，整合素旺αv、β3的表達隨anti-VEGF抗體濃度的增大而減弱，當anti-VEGF抗體濃度大于0.5μg/ml時，整合素αv、β3的表達隨anti-VEGF抗體濃度的增大而增強，在張力側組織表達比壓力側稍弱。④各組動物處死時體重均比實驗前輕

11、，但各組間其差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 結論：①在局部外源性VEGF調(diào)節(jié)下整合素αv、β3在牙周組織中的表達增強，同時因anti-VEGF抗體能阻斷了VEGF作用，使整合素αv、β3在牙周組織中表達減弱。其表達強弱都隨VEGF和anti-VEGF抗體注射濃度變化而改變。②在VEGF作用下正畸牙牙槽骨骨組織以吸收為主，牙齒移動較快；而anti-VEGF抗體的作用是抑制骨吸收，牙齒移動減慢。③局部短時間內(nèi)應用外源性VEGF和