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文檔簡介
1、目的:建立2型糖尿病大鼠動物模型,并探討2型糖尿病大鼠腫瘤壞死因子α在骨痂中表達(dá)的變化與糖尿病骨折愈合障礙的關(guān)系。
方法:30只健康雄性8周齡SD大鼠,隨機(jī)分為對照組15只,喂以普通飼料;實驗組15只,喂以高糖高脂飼料。8周后,實驗組一次性腹腔注射鏈脲佐菌素(30mg/kg),對照組腹腔注射等量枸櫞酸鹽緩沖液。2周后,將空腹血糖大于16.7mmol/L者納入實驗組繼續(xù)實驗,實驗組和對照組都建立大鼠左脛骨牽引成骨的實驗動物模
2、型,第二天起開始脛骨延長,延長持續(xù)14天。牽引速率為0.15mm/次,2次/天,共0.3mm/天,將實驗第8、10周及結(jié)束時收集的血清標(biāo)本分別檢測血糖、甘油三酯、總膽固醇、胰島素。牽引術(shù)后的第2,8,15天分組處死動物,采集左脛骨標(biāo)本,分別作組織學(xué)檢查(HE染色及免疫組織化學(xué))、RT-PCR檢查,每個時間點10只大鼠(對照和實驗組各5只)。
結(jié)果:8周后,實驗組大鼠血清甘油三酯、總膽固醇和胰島素較對照組升高,空腹血糖無明顯
3、差異。10周后及實驗結(jié)束時,實驗組大鼠空腹血糖、甘油三酯、總膽固醇較對照組升高,血胰島素?zé)o明顯差異。免疫組織化學(xué)及RT-PCR結(jié)果顯示實驗組較對照組骨組織中TNF-α的表達(dá)增高,且實驗組2型糖尿病骨折愈合障礙表現(xiàn)為:對照組X線攝片顯示骨折斷端之間牽引骨痂形成明顯減少;骨痂組織學(xué)檢查表現(xiàn)為微骨柱排列紊亂,初始基質(zhì)前沿淺染。
結(jié)論:高糖高脂飼養(yǎng)聯(lián)合小劑量STZ一次性腹腔注射建立的糖尿病大鼠模型具有高血糖、高甘油三酯、高膽固醇、
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