Cycloxygenase-2在急性胰腺炎相關(guān)性肺損傷中的作用及機制研究.pdf

1、研究背景 急性胰腺炎是以胰腺間質(zhì)水腫、出血、腺泡細胞空泡變性、壞死及炎癥細胞浸潤為病理特征、病變程度不一、結(jié)局難以預(yù)料的急性炎癥性疾病。急性胰腺炎常伴有全身炎癥反應(yīng)，約20[％]發(fā)展為重癥急性胰腺炎(多器官功能障礙或衰竭)，其病死率可高達40[％]以上。因此，SAP仍是目前常見的、嚴重威脅人類健康的重大疾病。 最近，前列腺素及源于前列腺素的炎癥介質(zhì)在介導(dǎo)急性胰腺炎全身炎癥反應(yīng)中的作用受到密切關(guān)注。環(huán)氧合酶(COX)是前列

2、腺素合成的關(guān)鍵限速酶，COX有兩種異構(gòu)體，COX-l為組成式表達，產(chǎn)生的前列腺素主要維持生理功能，COX-2是誘導(dǎo)性表達異構(gòu)體，在絕大多數(shù)正常組織無表達，但可在包括急性胰腺炎在內(nèi)的炎癥疾病中過表達，提示COX-2在急性胰腺炎的形成和發(fā)展中起著重要作用。迄今，有關(guān)COX-2在重癥急性胰腺炎及相關(guān)性肺損傷中的精確作用及機制尚不清楚。 目的 本研究旨在探討COX-2在實驗性重癥急性胰腺炎相關(guān)性肺損傷中的作用及機制。全文分兩部分

3、：在第一部分，主要探討COX-2在?；悄懰徕c誘導(dǎo)的大鼠急性出血壞死性胰腺炎肺組織中的動態(tài)表達情況與表達定位，并探討COX-2表達與肺損傷程度的相關(guān)性；在第二部分，主要評價COX-2高選擇性抑制劑Celecoxib對大鼠急性出血壞死性胰腺炎胰腺和肺組織損傷是否具有保護作用并重點探討方法以1ml／kg的劑量逆行胰膽管注射滅菌的5％?；悄懰徕c，誘導(dǎo)Sprague-Dawley大鼠急性出血壞死性胰腺炎模型；對照組：用等劑量的無菌生理鹽水替代牛磺

4、膽酸鈉逆行胰膽管注射；Celecoxib處理組：在急性出血壞死性胰腺炎大鼠模型誘導(dǎo)前2小時，以50mg／kg的劑量通過灌胃給予Celecoxib預(yù)處理；動態(tài)監(jiān)測3小時、6小時、12小時和24小時。按計劃于各時間點處死各組大鼠，收集血清及胰腺和肺組織。肺水腫嚴重程度以肺組織濕干重比表示；以碘-淀粉比色法測定血清淀粉酶，硝基還原法測定血清NO，采用BECKKAN DU640型分光光度計進行測定；放射免疫法測定血清TNF-α水平，動態(tài)濁度法測

5、定血清內(nèi)毒素水平。H．E染色用于胰腺和肺組織損傷的病理學評價，肺組織PTAH染色顯示微血栓；根據(jù)EBD標準曲線，采用比色法測定肺組織中EBD含量以反映肺血管通透性；采用BECKMAN DU640型分光光度計測定肺組織中髓過氧化酶、丙二醛和誘導(dǎo)性一氧化氮合酶活性；免疫組織化學法測定肺組織COX-2，NF-κ8和ICAM-1的表達；RT-PCR檢測肺組織中COX-2mRNA，iNOS mRNA，TNF-α mRNA和TFmRNA的表達。

6、 結(jié)論 本研究結(jié)果清楚表明，COX-2是SAP早期反應(yīng)基因，在急性胰腺炎相關(guān)性肺損傷的發(fā)生中起著關(guān)鍵的作用。COX-2的作用機理可能與其介導(dǎo)血管內(nèi)皮細胞的損傷與活化，導(dǎo)致肺微循環(huán)障礙和啟動炎癥反應(yīng)有關(guān)。 Celecoxib具有顯著改善急性胰腺炎相關(guān)性肺損傷的作用。其機制可能通過抑制核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的活化：(1)抑制COX-2表達及其介導(dǎo)的血管內(nèi)皮細胞損傷與活化，下調(diào)ICAM-1及TF的表達，改善微循環(huán)，抑制炎癥及