大鼠p-MCAO后延遲給予長時間亞低溫對NFkB和中性粒細胞的抑制.pdf

1、低溫在動物實驗中已被證明具有強大的缺血后神經(jīng)保護作用。常用的大腦局部缺血的動物模型有兩種：一過性大腦中動脈阻塞(t-MCAO)和持續(xù)性大腦中動脈阻塞(p-MCAO)。根據(jù)對已報道實驗的分析，低溫在p-MCAO中的治療時間窗只有1小時。這限制了低溫治療的臨床可行性。有一項報道在大鼠全腦一過性缺血模型中，缺血后6小時給予48小時的低溫可以減少CA1區(qū)神經(jīng)元的喪失。因此，本實驗在大鼠p-MCAO模型中延遲2小時和6小時給予長時間的低溫。已知大

2、鼠大腦中動脈阻塞后數(shù)小時開始有中性粒細胞在腦組織的浸潤，24小時達高峰；大鼠大腦中動脈持續(xù)阻塞后7小時時有缺血周圍區(qū)NFkB的活化和向核內(nèi)的轉(zhuǎn)移，且大部分的報道支持中性粒細胞浸潤和NFkB活化加重缺血后損傷。 本實驗通過腦組織切片中性粒細胞和NFkB的免疫組化染色，探索p-MCAO模型延遲給予長時間輕度低溫的神經(jīng)保護機制。 方法：線栓法阻塞大腦中動脈，SD大鼠分為3組，每組10只，分別為A組——延遲2小時給予22小時33

3、℃低溫，B組——延遲6小時給予18小時33℃低溫，C組——缺血組(對照組)。三組均在缺血后24小時取腦切片，用MPO抗體進行免疫組化染色，計數(shù)缺血周圍區(qū)浸潤的中性粒細胞數(shù)，用NFkB p65抗體進行免疫組化染色，分別計數(shù)NFkB p65免疫陽性的細胞和細胞核中NFkB p65陽性的細胞。 結(jié)果：缺血后24小時梗塞周圍區(qū)有中性粒細胞的浸潤，NFkB的活化和向核內(nèi)轉(zhuǎn)移。兩組低溫組的中性粒細胞數(shù)小于對照組(p<0.05)，兩組低溫組N