抗肺纖顆粒對博萊霉素誘導(dǎo)的大鼠肺纖維化模型的干預(yù)作用.pdf

1、目的：觀察中藥抗肺纖顆粒對肺纖維化大鼠病理變化、肺組織羥脯氨酸含量、支氣管肺泡灌洗液中細胞計數(shù)、分類及轉(zhuǎn)移生長因子β1(TGF-β1)表達的影響，探討抗肺纖顆粒治療肺纖維化的作用機制，為其臨床治療該病提供實驗依據(jù)。 方法：取體重190-210g的健康雌性SD大鼠90只，實驗條件下飼養(yǎng)一周，采用隨機數(shù)字表隨機分為6組，每組15只。博萊霉素(B組)：用博萊霉素(BLM)5mg/kg一次性注入氣管造模，當日開始用生理鹽水(0.9％NS

2、)4ml灌胃；抗肺纖顆粒高劑量組(H組)：氣管內(nèi)注入藥物同博萊霉素組，當日開始按大鼠體重每日每100g給予抗肺纖顆粒1g(即1g/100g/日)，溶于0.9％NS 4ml灌胃；抗肺纖顆粒中劑量組(M組)氣管內(nèi)注入藥物同博萊霉素組，當日開始按大鼠體重每日每100g給予抗肺纖顆粒0.5g(即0.5g/100g/日)，溶于0.9％NS 4ml灌胃；抗肺纖顆粒低劑量組(L組)氣管內(nèi)注入藥物同博萊霉素組，當日開始按大鼠體重每日每100g給予抗肺纖

3、顆粒0.25g(即0.25g/100g/日)，溶于0.9％NS 4ml灌胃；強的松組(P組)氣管內(nèi)注入藥物同博萊霉素組，當日開始按大鼠體重每日每100g給予強的松0.6mg(即0.6mg/100g/日)溶于0.9％NS 4ml灌胃；生理鹽水組(N組)：氣管內(nèi)注入0.9％NS0.2ml和胃內(nèi)灌入0.9％NS 4ml；各組大鼠于造模后第7、14和28天分別隨機處死5只。取左肺下葉用4％多聚甲醛固定，石蠟包埋切片，行HE染色、Masson三色

4、染色；右肺支氣管肺泡灌洗，收集灌洗液(BALF)計細胞總數(shù)及分類，用ELISA法測BALF上清液細胞因子TGF-β1的表達；右肺下葉采用酸解法測羥脯氨酸(HYP)含量。 結(jié)果： 1．HE染色光鏡下B組可見：第7天炎癥明顯，可見肺間質(zhì)和肺泡內(nèi)見大片狀炎性細胞浸潤；第14天時肺泡壁內(nèi)炎性細胞浸潤減少，成纖維細胞增多，肺泡隔增寬；第28天肺泡間隔明顯增寬，肺泡腔明顯縮小，肺泡壁破壞，部分肺泡塌陷或消失，肺間質(zhì)可見成纖維細胞增生

5、，膠原纖維增多；Masson染色鏡下觀察：出現(xiàn)被染為籃色的膠原纖維明顯增多，肺泡腔幾乎消失，由片狀膠原纖維和成纖維細胞占據(jù)，形成嚴重的肺纖維化。H組、M組、P組與B組比較，早期肺泡炎和晚期肺纖維化均有不同程度減輕。評分分析示：H組、M組、P組與B組比較有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，H組和P組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義，H組與M組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，L組與B組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。 2．B組第7天肺

6、組織羥脯氨酸含量增加，經(jīng)過28天后，B組大鼠肺組織羥脯氨酸含量顯著增加，與N組相比差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。P組、H組、M組與B組相比肺組織羥脯氨酸含量顯著降低，差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。H組和P組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義，H組與M組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，L組與B組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。 3．B組BALF細胞總數(shù)于第7天達到高峰，中性粒細胞比例升高達6％，巨噬細胞比例有所降低至84

7、％，但巨噬細胞絕對數(shù)升高，淋巴細胞略有升高，與N組相比有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；于第14天細胞總數(shù)及中性粒細胞、淋巴細胞比例降低，巨噬細胞比例升高，與N組相比差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；于第28天細胞總數(shù)及分類與N組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。經(jīng)治療后第7、14天，H組、M組、P組與B組比較差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，H組和P組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義，H組與M組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，L

8、組與B組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。;第28天各組BALF中細胞總數(shù)及分類與N組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。 4．B組BALF中TGF-β1水平于第7天達高峰，第14天略有降低，第28天維持較高水平，各時間點B組與N組相比有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。第7、14、28天P組、H組、M組的BALF中TGF-β1水平與B組相比差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；P組和H組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義；H組和M組相比