肺纖方對博萊霉素致大鼠肺間質纖維化的實驗研究.pdf

1、本實驗擬從宏觀和微觀角度觀察并分析博萊霉素致大鼠肺間質纖維化模型的特點，并將其特點與肺間質纖維化的中醫(yī)病機認識相比較，同時結合模型的特點、對肺間質纖維化的病機認識、肺纖方治療后大鼠從宏觀到微觀的各種變化，研究肺纖方對博萊霉素致大鼠肺間質纖維化的治療作用和肺纖方的作用機理，從而探討對肺間質纖維化的中醫(yī)病機認識和肺纖方治療肺間質纖維化的實驗室依據(jù)。肺纖方是導師姜良鐸教授在多年的臨床實踐和理論研究基礎上總結出來的治療肺間質纖維化的有效方劑，由

2、冬蟲夏草菌絲粉、生黃芪、紅景天、麻黃、銀杏、瓜蔞、水蛭、海蛤殼組成，該方針對肺間質纖維化肺腎虧虛、腎不納氣、氣虛血瘀、痰瘀深伏凝結痹阻肺絡的病機而設，具有補益肺腎、益氣活血、化瘀通絡、軟堅散結的作用。 采用氣管插管灌注博萊霉素的方法復制大鼠肺間質纖維化模型，選用醋酸潑尼松龍作為陽性對照藥進行本項研究。Wistar大鼠100只，隨機分入手術組85只，氣管插管灌注博萊霉素A5-生理鹽水1mg/kg體重，假手術組15只，灌注等體積生理

3、鹽水。手術組動物根據(jù)大鼠體重按照隨機數(shù)據(jù)表法隨機分入模型對照組29只、潑尼松對照組28只、肺纖方組28只，每組再隨機分入14、28、45三個時間點取材。觀測大鼠的整體狀況如精神、飲食、活動、皮毛、體重、死亡、及其它可能的臨床表現(xiàn)，肺組織大體和微觀的變化，研究這些變化與中醫(yī)病機認識的關系。測定肺系數(shù)，光鏡觀察肺組織病理，進行形態(tài)學半定量及定量分析，測定肺組織羥脯氨酸含量，以研究肺纖方對BLM致大鼠肺間質纖維化的治療作用；測血清轉化生長因子

4、β1和血小板衍生生長因子進行作用機制的初步探討。 通過對大鼠的日常觀察，發(fā)現(xiàn)肺纖方組整體狀況較好，在45天的實驗全程中沒有出現(xiàn)極度惡化的病例和死亡病例，而模型組死亡4例，潑尼松組死亡2例，但統(tǒng)計學顯示P＞0.05，考慮與樣本量太少和實驗設計非專為研究死亡率而設計有關；肺纖方組大鼠肺系數(shù)的減小速度比模型組和潑尼松組稍快，28天與14天肺系數(shù)比較顯著下降(P＜0.05)，而潑尼松組和模型組45天與14天比較顯著下降；肺組織病理結果顯

5、示肺纖方組纖維化程度有所減輕，肺間質纖維化分級結果顯示45天肺纖方組比模型組輕，(P＜0.05)；Masson染色的膠原分析結果顯示45天時膠原染色的面密度和數(shù)密度顯著低于模型組和潑尼松組(P＜0.05)；肺纖方組肺組織羥脯氨酸含量第28天時低于模型組(P＜0.05)，45天時低于模型組和潑尼松組(P＜0.05)。血清轉化生長因子β1(TGF-β1)和血小板衍生生長因子(PDGF)檢測結果顯示，模型組大鼠兩種因子水平持續(xù)升高，在45天時

6、尤為顯著，高于假手術組(P＜0.05)。肺纖方組與潑尼松組對TGF-β1沒有明顯的降低作用(P＞0.05)，二者對TGF-β1影響基本一致；肺纖方組PDGF水平在14天時與其余各組比較顯著升高(P＜0.01)，但持續(xù)下降，至45天與假手術組接近(P＞0.05)，而模型組和潑尼松組PDGF水平皆隨時間延長逐漸上升，45天時均顯著高于假手術組(P＜0.01)。 通過本項研究初步得出如下結論：(1)博萊霉素致大鼠肺間質纖維化的模型特點

7、與在臨床上對于肺間質纖維化的病機認識基本符合。 (2)肺纖方能改善BLM致肺間質纖維化大鼠的整體狀況，其作用優(yōu)于潑尼松。 (3)肺纖方治療能在較短時間內(nèi)降低BLM致肺纖維化大鼠的肺系數(shù)，其作用優(yōu)于潑尼松。 (4)肺纖方有一定的逆轉BLM致大鼠肺間質纖維化的作用，但對早期防止肺間質纖維化的形成效果不明顯。表現(xiàn)在45天病理檢測肺間質纖維化的程度減輕，羥脯氨酸含量下降。其作用優(yōu)于潑尼松。 (5)肺纖方和潑尼松對