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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:1.觀察新生大鼠缺氧缺血性腦損傷時(shí)心肌細(xì)胞Bcl-2、Bax等凋亡相關(guān)因子的表達(dá)情況。2.探討B(tài)ax抑制肽對(duì)缺氧缺血性腦損傷大鼠心肌細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用。
方法:健康7日齡Wistar大鼠,雌雄不限,共75只,平均分為三組:對(duì)照(Control)組、HIBD組、BIP組,每組按時(shí)間點(diǎn)分為12h、24h、48h、72h、7d五個(gè)亞組。Control組:實(shí)施頸部手術(shù),暴露左側(cè)頸總動(dòng)脈,但不結(jié)扎,不進(jìn)行缺氧處理,BIP組:手術(shù)結(jié)
2、扎左側(cè)頸總動(dòng)脈,缺氧處理后,0.5h內(nèi)給予BIP(80μL,5mg/mL)腹腔內(nèi)注入,HIBD組:與BIP組同樣處理動(dòng)物后給予80μL生理鹽水腹腔內(nèi)注入,三組分別于缺氧后12h、24h、48h、72h、7d時(shí)間點(diǎn)處死動(dòng)物取腦及心臟進(jìn)行各項(xiàng)指標(biāo)的檢測(cè)。2.觀察指標(biāo):TUNEL法檢測(cè)腦細(xì)胞及心肌細(xì)胞凋亡;SP法檢測(cè)Bcl-2、Bax、Cyt-C、Caspase-9等凋亡因子的表達(dá)情況;Western blot法檢測(cè)Caspase-3的表達(dá)。
3、
結(jié)果:1.與Control組比較,HIBD組、BIP組出現(xiàn)腦細(xì)胞凋亡;2.與Control組比較,HIBD組在48h、72h時(shí)間點(diǎn)心肌細(xì)胞凋亡明顯(P<0.01);與HIBD組比較,BIP組在48h、72h時(shí)間點(diǎn)心肌細(xì)胞凋亡均顯著下降(P<0.01),BIP組與Control組比較,各時(shí)間點(diǎn)心肌細(xì)胞凋亡均無(wú)明顯差別;3.心肌細(xì)胞Bcl-2、Bax、CytC、Caspase-9等凋亡相關(guān)因子的表達(dá):與Control組比較,HI
4、BD組、BIP組各時(shí)間點(diǎn)Bcl-2、Bax、CytC、Caspase-9的表達(dá)均顯著升高(P<0.05),12h開(kāi)始升高,72h達(dá)高峰,7d仍高于正常。與HIBD組比較,BIP組各時(shí)間點(diǎn)Bax表達(dá)差別不顯著(P>0.05),但是Bcl-2、CytC、Caspase-9在24h、48h、72的表達(dá)均顯著下降(P<0.05)。4.Western blot法檢測(cè)Caspase-3的表達(dá):與Control組比較,HIBD組、BIP組Caspas
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