Bax抑制肽對缺氧缺血腦損傷新生鼠抑制神經(jīng)細胞凋亡的作用.pdf

1、目的:通過檢測腦組織內凋亡陽性神經(jīng)細胞數(shù)目及caspase-3蛋白量，探討B(tài)ax抑制肽對缺氧缺血腦損傷新生鼠抑制神經(jīng)細胞凋亡的作用及有效治療時間窗。
　　 方法:選取7日齡Wister新生大鼠182只做為研究對象，隨機分為假手術組(n=14)、對照組(n=84)和實驗組(n=84)。對照組與實驗組通過結扎左側頸總動脈以及置于8％的氮氧混合氣中2小時建立缺氧缺血性腦損傷(hypoxia-ischemicbrain damage，H

2、IBD)模型，假手術組僅游離左側頸總動脈，不結扎不低氧處理。實驗組和對照組分別經(jīng)左側側腦室注射5ug Bax-抑制肽(5ul)和生理鹽水(5ul)。根據(jù)HIBD模型建立后注射Bax抑制肽和生理鹽水的時間不同，將實驗組和對照組分為0h、6h、12h、24h、48h、72h六個亞組(n=14)。假手術組不注射任何藥物。所有實驗動物均于HIBD模型建立后7天處死，進行腦組織病理檢測、TUNEL法檢測凋亡陽性神經(jīng)細胞數(shù)目、蛋白免疫印跡法檢測Ca

3、spase-3蛋白含量。
　　 結果:①左側海馬區(qū)腦組織HE染色:與假手術組比較，實驗組和對照組腦組織病理損傷明顯。實驗組與對照組在0h、6h、12h、24h、48h亞組比較，病理損傷程度較輕，在72h亞組比較無明顯差異。②TUNEL染色左側海馬區(qū)腦組織凋亡陽性神經(jīng)細胞數(shù)目:實驗組與對照組在0h、6h、12h、24h、48h各亞組比較，凋亡陽性神經(jīng)細胞數(shù)目明顯減少，差異有統(tǒng)計學意義;在72h亞組比較無統(tǒng)計學差異。實驗組的各亞組之

4、間依次比較，HIBD模型后越早注射Bax抑制肽，凋亡陽性神經(jīng)細胞數(shù)目越少，且差異有統(tǒng)計學意義。③蛋白免疫印跡法檢測左側海馬區(qū)腦組織caspase-3蛋白含量:實驗組和對照組在0h、6h、12h、24h、48h各亞組比較，caspase-3含量明顯減少，差異有統(tǒng)計學意義;在72h亞組比較無統(tǒng)計學差異。實驗組各亞組之間依次比較，HIBD模型后越早注射Bax抑制肽，腦組織內caspase-3含量越少，差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結論:①