治療視網(wǎng)膜中央靜脈阻塞新療法的初步研究.pdf

1、視網(wǎng)膜中央靜脈阻塞(CentralRetinalVeinOcclusion，CRVO)是最常見的視網(wǎng)膜血管性疾病之一，僅次于糖尿病性視網(wǎng)膜病變，視力預(yù)后不理想1-3。雖然已有一百多年的歷史，至今尚無公認(rèn)的療效明確的治療方法?，F(xiàn)有的治療方法均存在不同程度的爭議4-5。本研究旨在探討視神經(jīng)內(nèi)注射組織凝血酶元激活劑tPA治療CRVO的安全性，可行性及有效性。另外，活性氧自由基(Reactiveoxygenradicals，ROS)在缺血性疾病

2、的損傷機制中起重要作用。本實驗同時探討自由基清除劑Edaravone對大鼠視網(wǎng)膜靜脈阻塞的治療作用。 目的:研究探討視神經(jīng)內(nèi)注射組織凝血酶元激活劑tPA治療視網(wǎng)膜中央靜脈阻塞的安全性，可行性及有效性。同時探討自由基清除劑Edaravone對大鼠視網(wǎng)膜靜脈阻塞的治療作用。 方法:實驗一第一部分，經(jīng)兔睫狀體扁平部將0.1mltPA或者BSS注入視神經(jīng)內(nèi)研究其安全性和可行性。共分四組，每組6眼。首先將記錄VEP的電極植入兔顱骨

3、內(nèi)。每組分別注入25μgtPA，12.5μgtPA及BSS，并與第四組正常眼作比較。分別在注入后的第1，3天，1，2和4周行裂隙燈及間接眼底鏡檢查，記錄VEP及ERG，并行病理組織學(xué)和免疫組織化學(xué)檢查。實驗一第二部分，首先利用光敏劑及氬激光制備兔眼視網(wǎng)膜靜脈阻塞模型，經(jīng)FAG確認(rèn)后隨機分組。治療組(12眼，24支靜脈)視盤內(nèi)注射12.5μgtPA/0.05ml。對照組(12眼，24支靜脈)視盤內(nèi)注射0.05mlBSS。分別在注入后的第3

4、，7天行FAG檢查確認(rèn)靜脈的再通情況，同時行裂隙燈及間接眼底鏡檢查，并行病理組織學(xué)檢查。實驗二采用相同方法制備大鼠視網(wǎng)膜靜脈阻塞模型，靜脈阻塞的位置盡量靠近視盤邊緣。行眼底熒光造影(fluoresceinangiography，F(xiàn)A)確認(rèn)視網(wǎng)膜靜脈的阻塞情況。將眼底熒光造影顯示完全阻塞的眼隨機分為兩組，每組18眼。在激光照射后1小時，治療組結(jié)膜下注射Edaravone300μg/0.2ml，對照組結(jié)膜下注射0.2mlBSS。每日一次，共

5、3天。術(shù)后第3、7天摘除眼球行病理組織學(xué)，免疫組織化學(xué)檢查并制備視網(wǎng)膜勻漿，定量測定視網(wǎng)膜組織中丙二醛(malondialdehyde，MDA)及白細(xì)胞介素6(Interleukin-6，IL-6)的含量。 結(jié)果:裂隙燈，間接眼底鏡，VEP，ERG，病理組織學(xué)及免疫組織化學(xué)光鏡檢查未發(fā)現(xiàn)視神經(jīng)內(nèi)注射tPA對視神經(jīng)和視網(wǎng)膜有明顯的的毒性作用和其它損傷。各組視神經(jīng)切片每1mm2面積大小的平均細(xì)胞數(shù)量分別是2481.3±268.2，2

6、363.5±301.9，2455.5±272.1，及2417.8±302.9，各組間無顯著差異(P=0.0741)。各組VEP第一個波峰的潛伏期分別是24.60±1.54，24.09±1.92，24.01±1.96and24.57±1.25(P=0.4112)；各組VEP第一個波峰的振幅分別是123.91±41.77，145.16±41.22.132.36±48.22and116.78±29.44(P=0.0649)。各組ERG的A波的

7、潛伏期分別是5.95±0.42，5.86±0.41，5.87±0.46and5.81±0.33(P=0.6279)；a波的振幅分別是110.28±13.91，111.97±15.28，109.73±15.90and107.74±10.87(P=0.7248).b波的振幅分別是150.80±11.86，147.59±13.60，144.52±16.54and141.00±20.46(P=0.0957)。治療組阻塞靜脈的再通率是70.0％(

8、14/20)，對照組阻塞靜脈的再通率是16.7％(4/24)(P=0.001)。 大鼠靜脈阻塞成功后，阻塞部位遠(yuǎn)端的視網(wǎng)膜靜脈立刻出現(xiàn)淤曲、擴張，動脈變細(xì)。阻塞后短時間內(nèi)即出現(xiàn)滲出性視網(wǎng)膜脫離，并逐漸出現(xiàn)視網(wǎng)膜出血，水腫和玻璃體出血。病理組織學(xué)顯示嚴(yán)重的視網(wǎng)膜出血，水腫，壞死及視網(wǎng)膜脫離。在視網(wǎng)膜靜脈阻塞后的第3天，治療組和對照組視網(wǎng)膜組織中丙二醛-MDA的含量為分別是272.5nmol/g及352.65nmol/g(視網(wǎng)膜濕重

9、)(P=0.0035)。在視網(wǎng)膜靜脈阻塞后的第7天，治療組和對照組視網(wǎng)膜組織中丙二醛-MDA的含量分別為217.5nmol/g及318.33nmol/g(視網(wǎng)膜濕重)(P=0.0177)。在視網(wǎng)膜靜脈阻塞后的第3天，治療組和對照組視網(wǎng)膜組織中IL-6的含量為分別為15.67pg/mg及22.67pg/mg(視網(wǎng)膜濕重)(P=0.0037)。在視網(wǎng)膜靜脈阻塞后的第7天，治療組和對照組視網(wǎng)膜組織中IL-6的含量為17.17pg/mg及25.

10、50pg/mg(視網(wǎng)膜濕重)(P=0.0048)。 結(jié)論:經(jīng)睫狀體扁平部向兔視神經(jīng)內(nèi)注射tPA操作簡單，安全可行，未發(fā)現(xiàn)對視神經(jīng)及視網(wǎng)膜有明顯的毒性作用及其它損傷。視神經(jīng)內(nèi)注射12.5μgtPA/0.05ml提高了阻塞靜脈的再通率。經(jīng)睫狀體扁平部向視神經(jīng)內(nèi)注射tPA有望成為局部用藥治療CRVO的新方法。視神經(jīng)內(nèi)注射tPA的最佳安全劑量及最佳量-效關(guān)系有待進(jìn)一步研究。 Edaravone能夠抑制視網(wǎng)膜靜脈阻塞造成的急性缺血