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文檔簡介
1、目的:
1、制備一種兼具靶向及緩釋作用的載白介素-2磁性納米顆粒(IL-2-Fe3O4-PLGA),觀察其表征及性質(zhì)。
2、構(gòu)建S180肉瘤小鼠模型,觀察在體外磁場的作用下IL-2-Fe3O4-PLGA在腫瘤區(qū)的靶向富集和抗腫瘤效應(yīng)。
方法:
1、第一部分
1.1、用復(fù)乳揮發(fā)法制備IL-2-Fe3O4-PLGA,激光粒徑儀和掃描電鏡觀察IL-2-Fe3O4-PLGA大
2、小和形貌。
1.2、運(yùn)用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISAKit)測定IL-2-Fe3O4-PLGA的包封率、載藥量和體外釋藥特性。
1.3、MTT法測定其釋放的IL-2的生物學(xué)活性。
2、第二部分
2.1、在體內(nèi),給50只BALB/c小鼠于皮下注射S180肉瘤細(xì)胞,待腫瘤生長至約3×3mm3隨機(jī)分組(共5組,每組10只),分別給予不同治療:①外加磁場下給予IL-2-Fe3O4-PLGA,
3、②無外加磁場下給予IL-2-Fe3O4-PLGA,③給予空載的磁性納米顆粒Fe3O4-PLGA,④給予單純的IL-2,⑤給予生理鹽水為空白對照組,觀察比較腫瘤的生長及小鼠生存時(shí)間。
2.2、病理分析:腫瘤組織經(jīng)普魯士藍(lán)染色和HE染色,觀察IL-2-Fe3O4-PLGA在腫瘤區(qū)的富集情況。
結(jié)果:
1、第一部分
1.1、復(fù)乳揮發(fā)法制備的IL-2-Fe3O4-PLGA,用粒徑儀所測的尺
4、寸為150-2000nm,主要集中在500-700nm,平均直徑697±0.51nm,經(jīng)掃描電鏡觀察,IL-2-Fe3O4-PLGA呈圓球形,形貌良好。
1.2、ELISA測定IL-2-Fe3O4-PLGA納米粒包封率為83.76±2.12%和載藥量為[(6.93±0.17)×10-3]%。該納米粒在pH=7.4的磷酸鹽緩沖溶液中能持續(xù)釋放IL-2,15天累積釋放的IL-2的濃度為180ng/ml。
1.3、
5、MTT結(jié)果顯示,載IL-2磁性納米粒吸光度A值和空白對照組相比明顯增加(P<0.05),與IL-2陽性對照組相比,吸光度A值略有下降(P>0.05),差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說明IL-2在微粒中仍舊有活性,能促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖。
2、第二部分
2.1、IL-2-Fe3O4-PLGA加磁場組的瘤體體積小于其它各組,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.2、病理結(jié)果:①用普魯士藍(lán)染色觀察,IL-2-Fe3O4-PLGA
6、加體外磁場組可見腫瘤組織內(nèi)大量普魯士藍(lán)染色陽性顆粒;②HE染色結(jié)果IL-2-Fe3O4-PLGA加體外磁場組,可見腫瘤組織中出現(xiàn)炎癥細(xì)胞灶。
結(jié)論:
1、成功制備了兼具靶向及緩釋作用的IL-2-Fe3O4-PLGA,IL-2-Fe3O4-PLGA釋放的IL-2具有良好的生物學(xué)活性。
2、通過體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn),在外磁場引導(dǎo)作用下,IL-2-Fe3O4-PLGA組能靶向聚集于腫瘤區(qū),為靶向治療腫瘤提供了
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