銀杏黃酮的提取、抗氧化活性及構(gòu)效關(guān)系研究.pdf

1、銀杏黃酮是我國(guó)新開(kāi)發(fā)的一種植物類(lèi)黃酮制劑，由于其具有優(yōu)良的抗自由基、抗氧化、抗衰老、及保護(hù)心血管等方面的生物學(xué)功效，目前已受到國(guó)內(nèi)外的廣泛關(guān)注。本論文采用銀杏葉為原料，對(duì)銀杏葉中黃酮類(lèi)化合物的提取、含量檢測(cè)、抗氧化活性及構(gòu)-效關(guān)系等作了一系列較全面的研究，旨在為銀杏葉資源的開(kāi)發(fā)提供一些理論和實(shí)踐指導(dǎo)。主要研究?jī)?nèi)容和實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下： 1.首次采用纖維素酶酶解預(yù)處理與環(huán)糊精增溶作用相結(jié)合的方法提取銀杏葉總黃酮，經(jīng)單因素優(yōu)選實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)

2、驗(yàn)，確定了銀杏葉總黃酮的最佳提取工藝：料液比1/60，酶濃度0.2mg.ml-1，酶解時(shí)間150min，酶解溫度40℃，酶解pH=7.0，M-β-環(huán)糊精濃度2.0﹪，提取溫度60℃，提取時(shí)間180min。銀杏葉原料經(jīng)酶解預(yù)處理后加入甲基化β-環(huán)糊精水溶液浸提，對(duì)葉得率可達(dá)2.68﹪。該工藝與微波輔助提取和傳統(tǒng)的醇提法相比，提取率略有提高，操作簡(jiǎn)單易行，而且避免了有機(jī)溶劑的使用。這表明纖維素酶酶解及M-β-環(huán)糊精對(duì)黃酮類(lèi)化合物的包合增溶作

3、用在黃酮類(lèi)化合物提取方面具有廣泛的應(yīng)用前景。 2.用schaal烘箱法測(cè)定了銀杏葉提取物、天然番茄紅素、天然VE、VC以及它們復(fù)合而成的“復(fù)合天然抗氧化劑”對(duì)豬油的抗氧化活性。 結(jié)果表明銀杏葉提取物對(duì)豬油的抗氧化活性隨濃度的增加而提高，添加量為0.06﹪的銀杏葉提取物具有較強(qiáng)的抗氧化活性，抗氧化效果和添加量為0.02﹪BHA相當(dāng)。 銀杏葉提取物、天然番茄紅素、天然VE、VC對(duì)豬油均有一定的抗氧化活性，它們對(duì)豬油的

4、總體抗氧化能力為銀杏提取物＞天然VE＞天然番茄紅素＞VC。銀杏葉提取物與天然番茄紅素、天然VE、VC復(fù)合而成的“復(fù)合天然抗氧化劑”均表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗氧化活性，其中0.04﹪銀杏提取物+0.02﹪VC；0.04﹪銀杏葉提取物+0.01﹪VC+0.01﹪天然VE抗氧化效果最佳，表現(xiàn)出較好的協(xié)同增效作用，抗氧化效果優(yōu)于0.02﹪BHA 3.銀杏葉中主要黃酮類(lèi)化合物結(jié)構(gòu)-抗氧化活性的理論研究 采用組合的密度泛函方法(先用分子力場(chǎng)法

5、MM2對(duì)分子結(jié)構(gòu)進(jìn)行初始幾何優(yōu)化，然后用半經(jīng)驗(yàn)方法AM1進(jìn)行的幾何優(yōu)化，得到一個(gè)較為穩(wěn)定的分子結(jié)構(gòu)，最后用考慮電子相關(guān)的密度泛函理論的B3LYP方法在6-31G基組上進(jìn)行了較為精確全優(yōu)化計(jì)算)對(duì)槲皮素、銀杏素、兒茶素、山奈酚、楊梅酮、木樨草素、桑色素、紫杉葉素進(jìn)行了較為精確全優(yōu)化計(jì)算，得到分子的穩(wěn)定結(jié)構(gòu)和氧原子電荷密度、O-H電荷差、O-H鍵解離能的理論參數(shù)。 計(jì)算結(jié)果顯示，黃酮類(lèi)化合物的抗氧化、清除自由基活性主要取決于羥基相對(duì)