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文檔簡介
1、花椒(Zanthoxylum bungeanum)屬蕓香科(Rutaceae)植物,是我國一種傳統(tǒng)藥食兩用原料?;ń泛胸S富的黃酮類成分,但國內(nèi)外對(duì)花椒黃酮的研究較少。本文研究了花椒黃酮的提取、測(cè)定、分離、結(jié)構(gòu)驗(yàn)證與抗氧化活性,試驗(yàn)主要內(nèi)容如下:
(1)通過紫外-可見光掃描,對(duì)比黃酮測(cè)定的顯色體系,選擇硝酸鋁-亞硝酸鈉顯色法測(cè)定花椒黃酮。對(duì)四種不同產(chǎn)地的花椒總黃酮含量測(cè)定,花椒(茂汶)總黃酮含量194.4 mg/g,青花椒
2、(云南)189.0 mg/g,花椒(韓城)167.4 mg/g,青花椒(四川)162.0 mg/g。HPLC測(cè)定4種花椒中蘆丁和槲皮素的含量,花椒(韓城)中蘆丁含量最高17.29 mg/g。HPLC測(cè)定花椒黃酮水解液中黃酮苷元的含量,槲皮素含量最高,可達(dá)42.97 mg/g。
(2)通過正交試驗(yàn)法對(duì)花椒黃酮提取工藝進(jìn)行優(yōu)化,考察了提取溫度、料液比、時(shí)間及乙醇濃度四個(gè)因素對(duì)花椒黃酮得率的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明,各因素對(duì)黃酮提取得
3、率的影響程度由大到小依次為:提取溫度>乙醇濃度>料液比>浸提時(shí)間,最佳工藝條件為:乙醇濃度60%,提取時(shí)間1 h,料液比1:40g/mL,提取溫度70℃,在此條件下花椒黃酮的得率為19.87%。
(3)采用大孔樹脂法純化花椒黃酮,選取效果最好的AB-8型大孔樹脂進(jìn)行純化。最佳條件為:上樣濃度3.0-4.0 mg/mL;上柱pH4.5左右;上柱速度2.5 mL/min,洗脫劑最適宜體積分?jǐn)?shù)與洗脫劑用量分別為70%和3 BV。
4、經(jīng)AB-8型大孔吸附樹脂純化后,花椒黃酮的純度由51.46%提高到90.25%,提高了1.75倍。
(4)采用清除DPPH自由基、還原力測(cè)定、總抗氧化力測(cè)定和抑制脂質(zhì)體過氧化能力模型評(píng)價(jià)花椒黃酮的抗氧化能力,并與抗壞血酸進(jìn)行了對(duì)比。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:花椒黃酮具有良好清除DPPH·自由基作用,具有較強(qiáng)的還原力、抗氧化能力和抑制油脂氧化能力。純化花椒黃酮抗氧化能力強(qiáng)于未純化樣。
(5)HSCCC分離花椒黃酮研究中,以
5、氯仿.甲醇-正丁醇-水(4:3:0.5:2,V/V)為溶劑體系。先進(jìn)行正向洗脫,分離得5種黃酮化合物化合物。再調(diào)換流動(dòng)相進(jìn)行反向洗脫,得到六個(gè)化合物。將經(jīng)HPLC檢測(cè)純度達(dá)到85%以上的4個(gè)化合物A、B、C、D進(jìn)行核磁共振氫譜結(jié)構(gòu)驗(yàn)證。A為槲皮素-3-阿拉伯糖苷(quercetin3-arabinoside);B為槲皮素-7-葡萄糖苷(quercetin7-glucoside);C為蘆丁(rutin);D為槲皮素-3-半乳糖苷(quer
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