一氧化氮對(duì)兔纖維環(huán)細(xì)胞生物學(xué)行為的影響.pdf

1、目的：研究一氧化氮（NO）對(duì)兔纖維環(huán)細(xì)胞生物學(xué)行為的影響及其相關(guān)機(jī)制。
　　 方法：構(gòu)建兔纖維環(huán)細(xì)胞凝膠培養(yǎng)模型并將其為 7組，分別向培養(yǎng)基內(nèi)加入不同濃度的NO供體硝普鈉（SNP）及iNOS抑制劑煙酰胺和1400W進(jìn)行干預(yù)。干預(yù)3天后分別采用MTT法、Annexin V-PI染色、線粒體膜電位JC-1染色和RT-PCR檢測(cè)各組纖維環(huán)細(xì)胞增殖活力、細(xì)胞凋亡狀況、細(xì)胞線粒體膜電位及細(xì)胞聚集蛋白多糖（aggrecan)、Ⅰ和Ⅱ型膠原基

2、因表達(dá)。
　　 結(jié)果：①M(fèi)TT檢測(cè)顯示：第3、4組吸光度值（A）較正常對(duì)照組明顯下降（P<0.05，P<0.05），而第5、6、7組均高于第3組（P<0.05，P<0.05，P<0.05）。②流式細(xì)胞儀分析顯示：第2、3、4組凋亡細(xì)胞比例遠(yuǎn)高于正常對(duì)照組，其中第4組高達(dá)32.98％；第5、6、7組凋亡細(xì)胞比例較第3組均有所下降，但仍高于正常對(duì)照組。③熒光分光光度計(jì)分析顯示：第2、3、4組紅綠熒光比值較正常對(duì)照組明顯下降（P<0.

3、05，P<0.05，P<0.05），而第5、6、7組均高于第3,4組（P<0.05，P<0.05，P<0.05）。④RT-PCR顯示：第2、3、4組aggrecan、Ⅰ和Ⅱ型膠原基因表達(dá)較正常對(duì)照組均明顯降低（P<0.05，P<0.05，P<0.05），而第5、6、7組較第3組均明顯增加（P<0.05，P<0.05，P<0.05）。
　　 結(jié)論：NO對(duì)兔纖維環(huán)細(xì)胞生物學(xué)行為有較強(qiáng)的干擾作用，可能在纖維環(huán)損傷機(jī)制中扮演著重要角色。