黃芪多糖對輻射致乳鼠心肌細胞損傷的保護作用及其機制探討.pdf

1、目的:探討黃芪多糖(Astragalus polysaccharide,APS)對輻射所致心肌細胞損傷的可能保護作用及其機制。
　　方法:原代提取Wistar乳鼠心肌細胞,密閉培養(yǎng)于37℃、5％CO2培養(yǎng)箱中,取對數(shù)生長期的心肌細胞,用 X線照射心肌細胞建立輻射損傷模型,用不同濃度的 APS進行干預(yù)。實驗分五組:正常對照組;輻射損傷模型組(照射劑量為6Gy);黃芪多糖低劑量干預(yù)組(終濃度為0.025mg/mL);黃芪多糖中劑量干預(yù)

2、組(終濃度為0.05mg/ mL);黃芪多糖高劑量干預(yù)組(終濃度為0.1mg/mL)。MTT法檢測各組心肌細胞生長抑制率;流式細胞儀(Flow Cytometry,FCM)檢測各組心肌細胞的細胞周期和細胞凋亡;激光共聚焦(laser confocal microscope,LSCM)檢測各組心肌細胞線粒體功能;DCFH-DA熒光探針檢測各組心肌細胞 ROS表達水平;蛋白印跡法檢測各組心肌細胞內(nèi) CytC、Caspase-3、Caspas

3、e-9蛋白的相對表達。
　　結(jié)果:正常心肌細胞呈圓形、梭形及多邊形等多種形態(tài),細胞之間通過偽足相互交織成網(wǎng),呈簇狀生長。輻射損傷后心肌細胞部分變圓、漂浮、開始出現(xiàn)凋亡。與正常對照組相比,輻射損傷組心肌細胞生長抑制率明顯升高、細胞周期延長、凋亡增加、線粒體功能異常、線粒體膜電位(Mitochondrial membrane potential,ΔΨm)降低、ROS表達及 CytC,Caspase-3,Caspase-9蛋白的相對表達

4、量明顯升高,差異具有顯著性(p<0.05)。與輻射損傷組相比,黃芪多糖(APS)各干預(yù)組心肌細胞生長抑制率均不同程度下降、細胞周期均不同程度縮短、凋亡減少、線粒體功能有所改善,線粒體膜電位(ΔΨm)有所升高、ROS表達及 CytC,Caspase-3,Caspase-9蛋白的相對表達量均不同程度降低(p<0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.黃芪多糖(APS)可以通過清除 ROS、縮短細胞周期、促進心肌細胞增殖、穩(wěn)定線粒體膜電位