農藥脅迫對擬環(huán)紋豹蛛等位酶的影響.pdf

1、本文首次報道了長期農藥脅迫對農田狼蛛優(yōu)勢類群體內過氧化物酶(POD)和酯酶(EST)等位酶的影響，并且改進了在室溫低于10℃的條件下蜘蛛類的POD酶聯苯胺染色的實驗方法，在60℃水浴中染色著色效果明顯改善，這一發(fā)現為今后同類研究開啟了思路，提供了條件。本文就此做了以下幾個方面的研究： (一) 應用聚丙烯酰胺凝膠垂直板型電泳技術，對稻田中四種蜘蛛：擬環(huán)紋豹蛛(Pardosapseudoannulata)、溝渠豹蛛(Pardosa

2、laura)、武昌獾蛛(Trochosa wuchangensis)和白跗狡蛛(Dolomedes pallitarsis)的過氧化物酶(POD)和酯酶(EST)等位酶進行了比較研究，結果表明：四種蜘蛛的POD和EST同工酶譜帶清晰，種間差異較明顯(P<0.05)，同一生境下POD酶和EST酶種內穩(wěn)定性好。 (二)重點探討了長期農藥脅迫對稻田狼蛛優(yōu)勢種擬環(huán)紋豹蛛自然種群體內的POD和EST兩類酶的影響：應用電泳分離技術，比較了施

3、藥(以甲胺磷等有機磷農藥為主)稻區(qū)的雷鋒鎮(zhèn)擬環(huán)紋豹蛛種群與未施藥的天項鄉(xiāng)擬環(huán)紋豹蛛種群的POD和EST同工酶酶譜后，發(fā)現在農藥脅迫下擬環(huán)紋豹蛛POD酶和EST酶有明顯的變化。施藥的擬環(huán)紋豹蛛種群的酶帶類型明顯多于未施藥的種群：POD酶共有遷移率(Rf)不同的5個等位酶位點，Rf=269、Rf=33、Rf=122和Rf=170四條酶帶是未施藥種群所沒有的，施藥種群POD酶的多態(tài)性明顯增強。EST酶出現的Rf值區(qū)不同的8種酶帶，其中EST1

4、 (Rf=30)、EST4(Rf=215～232)、EST6(Rf=332～345)和EST7(Rf=336～375)等遷移率區(qū)的酶帶僅見于施藥區(qū)的雷鋒鎮(zhèn)種群，在未施藥區(qū)天頂鄉(xiāng)種群中尚沒有發(fā)現；并且施藥區(qū)雷鋒鎮(zhèn)種群酶帶濃度均顯著高于未施藥的天項鄉(xiāng)種群。 同時，為了驗證POD同工酶的活性，本文又應用分光光度法測定了在最大吸收波長385nm條件下測得，施藥的雷鋒鎮(zhèn)種群POD酶的總活力為1.589，而未施藥的天項鄉(xiāng)種群的為1.056，

5、雷鋒鎮(zhèn)種群的活力顯著大于天頂鄉(xiāng)種群，這一結果初步證明了農藥長期作用致使擬環(huán)紋豹蛛的POD酶活性增大。 上述差異為什么會出現在同一地理條件下的自然種群內，作者認為長期施用化學農藥(有機磷)是造成這一結果的主要因子，可能是擬環(huán)紋豹蛛對長期農藥脅迫產生了適應性突變和遺傳分化的緣故。 (三)甲胺磷農藥脅迫對擬環(huán)紋豹蛛實驗種群的POD和EST等位酶的影響：在室內用稀釋成為原液濃度0.0025倍的甲胺磷農藥直接喂養(yǎng)擬環(huán)紋豹蛛，經過2