重樓提取物對SW480細(xì)胞的毒性作用及作用機(jī)制研究.pdf

1、目的:以重樓提取液為作用因素,通過測定人結(jié)腸癌SW480細(xì)胞的抑制率,觀察其形態(tài)學(xué)變化,分析人結(jié)腸癌細(xì)胞周期改變,研究重樓對人結(jié)腸癌SW480細(xì)胞增殖的影響；并在基因和蛋白質(zhì)水平檢測干細(xì)胞因子(Stem Cell Factor,SCF)在重樓作用后細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)差異,探討SCF與人結(jié)腸癌治療及發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。
　　 方法:采用10μg/mL、20μg/mL,、40μg/mL、80μg/mL的重樓提取液分別與體外培養(yǎng)的SW480細(xì)胞

2、作用12、24、36、48 h,用MTT方法檢測對腫瘤細(xì)胞的抑制率。并以IC50作為實(shí)驗(yàn)用藥物濃度,取對數(shù)生長期的SW4180細(xì)胞,與重樓提取液作用24 h后,通過流式細(xì)胞術(shù)分析其對SW480細(xì)胞周期的影響。并通過RT-PCR和Western-Blotting方法測定SW480細(xì)胞干細(xì)胞因子的mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)變化,探討藥物抑制作用與細(xì)胞內(nèi)SCF含量之間的關(guān)系。
　　 結(jié)果:各濃度重樓提取液均對SW480細(xì)胞有抑制作用,并存在

3、明顯的劑量.效應(yīng)、時間-效應(yīng)關(guān)系。重樓提取液作用后的細(xì)胞出現(xiàn)明顯變性壞死的形態(tài)改變。流式細(xì)胞法分析細(xì)胞周期變化的結(jié)果顯示:經(jīng)重樓提取液處理后,SW480細(xì)胞在S期的分布比例下降,G0/G1期和G2/M期細(xì)胞分布增多(P<0.05);同時干細(xì)胞因子表達(dá)增高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　 結(jié)論:重樓提取液對SW480細(xì)胞具有明顯細(xì)胞毒性及抑制細(xì)胞增殖的作用,且這種作用有明顯的劑量.效應(yīng)、時間-效應(yīng)關(guān)系。重樓提取液可使SW