腎絡(luò)通對腎間質(zhì)纖維化實驗動物大鼠腎組織血管活性物質(zhì)的作用.pdf

1、目的：腎間質(zhì)纖維化是多種腎臟疾病終末期的共同病理表現(xiàn)。采用單側(cè)輸尿管結(jié)扎方式制備梗阻性腎病模型，病理改變最終表現(xiàn)為腎間質(zhì)纖維化。腎間質(zhì)纖維化的形成是由多種因素共同介導(dǎo)所致，包括血液動力學(xué)因素和非血液動力學(xué)因素。血液動力學(xué)因素與腎素血管緊張素系統(tǒng)（RAS）關(guān)系最為密切，激活腎素-血管緊張素系統(tǒng)（RAS），破壞了體內(nèi)TXA2與PGI2，內(nèi)皮素-1（ET-1）與一氧化氮（NO）的平衡，導(dǎo)致局部微循環(huán)障礙，從而破壞腎臟正常的結(jié)構(gòu)與功能。隨著細(xì)胞

2、分子生物學(xué)方法的發(fā)展，目前認(rèn)為患者體內(nèi)多種血管活性物質(zhì)的代謝紊亂，以及由此引發(fā)的血流動力學(xué)異常是促使其病情慢性漸進(jìn)性發(fā)展的重要環(huán)節(jié)，其中腎素-血管緊張素系統(tǒng)，血栓素B2（T3032）、6-酮-前列腺素（6-keto-PGF1a）、內(nèi)皮素-1（ET-1）、一氧化氮（NO）起的作用備受關(guān)注。本課題通過實驗研究，觀察腎絡(luò)通對梗阻性腎病模型大鼠腎素-血管緊張素系統(tǒng)、血栓素B2、6-酮-前列腺素、內(nèi)皮素及一氧化氮含量的影響，為臨床應(yīng)用腎絡(luò)通治療梗

3、阻性腎病提供實驗依據(jù)。
　　 方法：健康雌性SD大鼠40只，隨機分為假手術(shù)組（Sham group）、模型組（UUO group）、纈沙坦治療組（UUOV group）、腎絡(luò)通治療組（UUOS group組），每組10只。左側(cè)輸尿管接扎造膜，給藥2周，最后一次給藥后，收集24小時尿液，測尿量，24h蛋白定量。稱重后，斷頭取血，檢測血清尿素氮、血肌酐；無菌操作，摘取左、右腎，去包膜稱重，固定左腎組織，-20度冷藏以備病理組織觀察，

4、腎組織勻漿，用放射免疫方法測局部Renin、ACE、AngⅡ、TXB2、6-keto-PGF1a、ET-1、NO含量；免疫組化方法測血管緊張素轉(zhuǎn)化酶原表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1、腎絡(luò)通對UUO大鼠24h蛋白定量的影響
　　 假手術(shù)組相比，模型組、腎絡(luò)通組、纈沙坦組，均有顯著性差異（P<0.05）；與模型組相比，兩治療組24h尿蛋白下降（P>0.05）；兩治療組之間無明顯差異（P>0.05）。
　　 2

5、、腎絡(luò)通對UUO大鼠BUN、Scr的影響
　　 模型組明顯高于假手術(shù)組（P<0.05）；與模型組相比，兩治療組BUN、Scr顯著性下降（P<0.05）；兩治療組比較無差異（P>0.05）。
　　 3、腎絡(luò)通對UUO大鼠腎組織Renin、ACE、AngⅡ的影響
　　 腎組織腎素活性檢測結(jié)果顯示：與假手術(shù)組相比，模型組、纈沙坦組、腎絡(luò)通組大鼠腎組織腎素活性明顯下降（P<0.05）；與模型組相比，纈沙坦組和腎絡(luò)通組大鼠

6、腎組織腎素活性無明顯差異（P>0.05）；纈沙坦組和腎絡(luò)通組比較則無明顯差異（P>0.05）。腎組織ACE活性檢測結(jié)果：與模型組相比，假手術(shù)組、纈沙坦組和腎絡(luò)通組大鼠腎組織ACE活性顯著降低（P<0.05）；與假手術(shù)組相比，纈沙坦組和腎絡(luò)通組無明顯差異（P>0.05）。大鼠腎組織AngⅡ含量結(jié)果顯示：與模型組相比，假手術(shù)組、纈沙坦組、腎絡(luò)通組顯著降低（P<0.05）；兩治療組比較則無明顯差異（P>0.05）。
　　 4、腎絡(luò)通對

7、UUO大鼠腎組織TXB2含量的影響
　　 與模型組相比，纈沙坦組、腎絡(luò)通組、假手術(shù)組腎組織TXB2的含量顯著降低（P<0.05）；與假手術(shù)組比較，纈沙坦組、腎絡(luò)通組大鼠腎組織TXB2含量則明顯升高（P<0.05）；纈沙坦組與腎絡(luò)通組比較則無明顯差異（P>0.05）。
　　 5、腎絡(luò)通對UUO大鼠腎組織6-keto-PGF1a含量的影響
　　 與模型組相比，纈沙坦組、腎絡(luò)通組、假手術(shù)組腎組織6-keto-PGF1a

8、的含量顯著升高（P<0.05）；而假手術(shù)組比較，纈沙坦組、腎絡(luò)通組大鼠腎組織6-keto-PGF1a含量明顯降低（P<0.05）；纈沙坦組與腎絡(luò)通組比較則無明顯差異（P>0.05）。
　　 6、腎絡(luò)通對UUO大鼠腎組織ET-1含量的影響
　　 與模型組相比，假手術(shù)組、纈沙坦組及腎絡(luò)通組腎組織ET-1含量有所降低（P>0.05）；與假手術(shù)組相比，治療組比較則無明顯差異（P>0.05）。
　　 7、腎絡(luò)通對UUO大鼠

9、腎組織NO含量的影響
　　 與假手術(shù)組相比，纈沙坦組和腎絡(luò)通組有所升高（P>0.051）；與模型組相比，纈沙坦組、腎絡(luò)通組NO含量無明顯差異（P>0.05）。
　　 8、免疫組化測腎絡(luò)通對ACE在腎組織的表達(dá)的影響
　　 假手術(shù)組腎小管上皮細(xì)胞和腎間質(zhì)細(xì)胞的細(xì)胞漿ACE呈弱陽性表達(dá)（0.85±0.11），模型組表達(dá)明顯增強（2.65±0.18），與假手術(shù)組相比有顯著性差異（P<0.05），纈沙坦組（1.70±0.

10、17）腎絡(luò)通組（1.65±0.18）腎小管上皮細(xì)胞及間質(zhì)表達(dá)明顯減弱，與模型組相比有顯著性差異（P<0.05）；兩治療組相比無顯著性差異。
　　 結(jié)論：
　　 1、腎絡(luò)通能減輕腎組織的病理損害，減少病變腎組織細(xì)胞外基質(zhì)成分的積聚，延緩間質(zhì)纖維化的進(jìn)程。
　　 2、腎絡(luò)通能糾正腎臟局部RAS系統(tǒng)異常：通過抑制ACE和AngⅡ，減輕對腎臟的損傷。
　　 3、腎絡(luò)通能抑制血栓素和內(nèi)皮素的分泌，改善腎臟血流，抑制