扶腎降濁方干預(yù)MsPGN大鼠腎間質(zhì)纖維化的作用機制.pdf

1、目的：
　　觀察扶腎降濁方對系膜增生性腎炎大鼠生化指標定量、腎臟組織病理學(xué)變化以及纖維化因子表達的影響，探討扶腎降濁方對腎纖維化大鼠腎臟保護作用的可能機制。
　　方法：
　　1.將24只健康Wistar大鼠隨機分為四組：正常組、模型組、扶腎降濁方組、貝那普利組，普通飼料適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后，采用系膜增生性腎炎(MsPGN)模型，延長造模時間至12周，使其自然發(fā)展成腎臟纖維化模型。
　　2.從實驗第1天對治療組給予藥物

2、干預(yù)，中藥組以扶腎降濁方灌胃，劑量為51.5g·kg-1·d-1，西藥組以貝那普利灌胃，劑量為4mg·kg-1·d-1，給藥體積為10ml·kg-1，直至實驗結(jié)束。
　　3.12周末前兩天分別用代謝籠收集四組大鼠24小時尿液，測定24h尿蛋白定量；于12周末腹主動脈取血，留取血清檢測血尿素氮、肌酐、β2-微球蛋白。
　　4.于12周末，將大鼠全部處死。迅速打開腹腔，取出腎組織分成大小不等的幾部分，分別用于光鏡和免疫組化檢測。

3、
　　5.運用免疫組化法觀察腎組織切片中TGF-β1、Smad3、ILK、ColⅠ、BMP-7、HGF蛋白的表達情況，探討扶腎降濁方對TGF-β1-Smads-ILK信號傳導(dǎo)通道及纖維化因子的作用。
　　6.各組大鼠實驗數(shù)據(jù)應(yīng)用 SPSS17.0統(tǒng)計軟件根據(jù)方差齊性結(jié)果，選擇進行單因素方差分析及非參數(shù)檢驗，根據(jù)分析結(jié)果了解各指標間的相互關(guān)系，初步探討扶腎降濁方抑制腎間質(zhì)纖維化的可能機制。
　　結(jié)果：
　　1.與正

4、常組相比，模型組24h尿蛋白、血尿素氮、肌酐、β2-微球蛋白明顯升高（均P＜0.01），扶腎降濁方組及貝那普利組與模型組比較均降低（均P＜0.05）。
　　2.光鏡結(jié)果顯示：模型組腎小管上皮細胞變性壞死，系膜增生，間質(zhì)纖維化明顯；扶腎降濁方組、貝納普利組與模型組相比均明顯減輕，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(均P＜0.01)。
　　3.免疫組化結(jié)果表明：模型組TGF-β1、Smad3、ILK、ColⅠ蛋白的表達程度比正常組明顯升高(均P

5、＜0.01)，扶腎降濁方組、貝納普利組與模型組相比均降低(均P＜0.05)。模型組BMP-7、HGF蛋白的表達程度比正常組明顯降低(均P＜0.01)，扶腎降濁方組、貝納普利組均較模型組明顯提高(均P＜0.01)。
　　結(jié)論：
　　實驗結(jié)果表明：扶腎降濁方對系膜增生性腎炎大鼠腎纖維化具有很好的保護作用，其機制可能通過降低24h尿蛋白、血尿素氮、肌酐、β2-微球蛋白定量從而改善腎功能；抑制促纖維化因子TGF-β1、Smad3、I