疾病動(dòng)物模型研究和精子載體法的轉(zhuǎn)基因技術(shù).pdf

1、21世紀(jì)是基因的時(shí)代,人類(lèi)基因組測(cè)序工作的完成,功能基因的研究也成為了該世紀(jì)生命科學(xué)研究的熱點(diǎn),這一理念也給疾病動(dòng)物模型的研究領(lǐng)域帶來(lái)了翻天覆地的變化.現(xiàn)在我們知道,所有的疾病都或多或少的與基因有著直接或間接的聯(lián)系.我們把他們分為三大類(lèi):單基因病,多基因病以及獲得性基因病.而疾病動(dòng)物模型建立的主要原則就是病因誘導(dǎo)原則.以往的非基因時(shí)代,傳統(tǒng)的以自發(fā)性和誘發(fā)性方法建立的疾病動(dòng)物模型,在人類(lèi)對(duì)疾病的研究探索中起到了重要的作用.而今,隨著人們

2、對(duì)基因的不斷了解,各種現(xiàn)代基因敲除技術(shù)和轉(zhuǎn)基因技術(shù)等分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展,無(wú)疑會(huì)對(duì)疾病動(dòng)物模型的建立產(chǎn)生革命性的作用,而且到目前為止這一作用已經(jīng)十分明顯.現(xiàn)代與傳統(tǒng)方法的結(jié)合是今后建立疾病動(dòng)物模型的大趨勢(shì).人為建立遺傳易感性的疾病動(dòng)物模型,首先要實(shí)現(xiàn)對(duì)基因的操作.去掉或增加某一基因都離不開(kāi)轉(zhuǎn)基因技術(shù).以往常用的轉(zhuǎn)基因技術(shù)有以下幾種:顯微注射法,脂質(zhì)體法,胚胎干細(xì)胞的轉(zhuǎn)基因技術(shù),電穿孔法,磷酸鈣沉淀法以及逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)染法等.它們各有優(yōu)缺點(diǎn)

3、.而在上世紀(jì)80年代末發(fā)展的精子載體法的轉(zhuǎn)基因技術(shù)是目前轉(zhuǎn)基因技術(shù)領(lǐng)域中的一個(gè)亮點(diǎn).和以往的轉(zhuǎn)基因技術(shù)相比,精子載體法的轉(zhuǎn)基因技術(shù)應(yīng)用的物種范圍更廣泛,外源基因的整合是由非同源重組的定點(diǎn)整合,對(duì)外源基因的設(shè)計(jì)要求不高,而且在轉(zhuǎn)基因成功的文章中轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的產(chǎn)生率還比較高.但是精子載體法的轉(zhuǎn)基因技術(shù)畢竟還處于起步階段,對(duì)其機(jī)理的了解還不甚清楚,尚有許多有待研究和改進(jìn)的地方.我們嘗試建立了精子載體法轉(zhuǎn)基因技術(shù)的實(shí)驗(yàn)平臺(tái),對(duì)各個(gè)步驟的相關(guān)影響因