規(guī)?；龅呐２《拘愿篂a凈化評估與病原分析.pdf

1、牛病毒性腹瀉是由牛病毒性腹瀉病病毒(BVDV)是危害養(yǎng)牛業(yè)生產的重要病原之一。感染40天至妊娠期120天的母牛，即使妊娠期滿后能順利產下犢牛，但此時的小牛卻對該病毒有“免疫耐受”現(xiàn)象，并且將轉變?yōu)槿后w中新的傳染源（持續(xù)感染牛，PI），妊娠期母牛可通過通過這種方式產生的持續(xù)感染小牛(PI)是在群體中重要的傳染源。由于PI牛者經(jīng)常發(fā)生病毒血癥并會持續(xù)向環(huán)境中排放病毒，因此其識別和從牧群中消滅PI牛是控制和根除BVDV的程序的重要組成部分。<

2、br>　　本研究以在奶缸中取出的樣本檢測BVDV抗體來評估牧場牛群的BVDV感染情況，結合檢測奶樣的結果了解了BVD在黑龍江省內一部分地方的流行情況。通過抗體檢測結果確定了目標凈化牛場，制定了合理的凈化程序，將對目標凈化牧場全群牛只進行BVDV抗原檢測。檢測結果為陽性的牛只，2～3周后對其進行重新采樣檢測（為了排出一過性感染的干擾）如果再次采樣抗原檢測還為陽性，建議對該牛只進行淘汰。然后采取長時間的群體抗體監(jiān)測是否有較大的抗體水平的波動

3、，以判斷是否有PI牛的存在以便及時進行抗原篩查以及提高飼養(yǎng)管理水平等綜合有效的生物安全管理措施保證根除的有效性。利用IDEXX BVDV抗體檢測試劑盒檢測了從黑龍江不同地區(qū)的未接種過BVDV疫苗的規(guī)?；翀鲋惺占拇蟾啄?6份，其中52份大缸奶中檢測到BVDV抗體，占總檢測數(shù)的92.85％。證明了BVD在黑龍江省流行的嚴重情況。利用IDEXX BVDV抗原檢測試劑盒共檢測奶牛耳部切口組織樣品，完成了對目標凈化牛場PI牛的初步篩查工作。P

4、I牛占檢測總數(shù)的4.23％。通過PI牛的血清和糞便進行了病毒分離，并成功在牛腎細胞上分離出病毒。對分離得到的病毒進行了電鏡觀察、理化特性和一部分相關生物學特性的研究并繪制了分離毒株的一步生長曲線。利用RT-PCR擴增出了5'UTR區(qū)的一段特異性片段。通過與公開的BVDV參考序列進行比對以及利用RT-PCR分型引物確定分離病毒的類型，確定為BVDV1型毒株并命名為X0619。通過與其它31株BVDV毒株和2株CSFV毒株的核苷酸序列成功構