茯苓多糖提取工藝的優(yōu)化及開發(fā)利用研究.pdf

1、對茯苓多糖的浸提、分離、純化工藝及其單糖組分等進行了研究，結果如下： 1．茯苓多糖的熱水浸提工藝優(yōu)化 首先對溶劑的用量、溶劑pH、浸提溫度、浸提時間、浸提次數進行單因素實驗，然后選取靈敏因素進行正交實驗優(yōu)化。確定熱水浸提的最佳工藝條件為：浸提時間：3小時，浸提溫度：80℃，浸提次數：2次，浸提固液比1：40。 2．茯苓多糖的酶解+熱水浸提法工藝研究 首先對酶加入量、酶解液pH值、酶解溫度、酶解時間、固液比

2、等進行單因素實驗，然后選取靈敏因素進行正交實驗優(yōu)化。確定酶解+熱水浸提法的最佳工藝條件為：固液比1：10，溫度：48℃，時間：90min，pH值=5，加酶量：1％。酶解反應和熱水浸提兩個階段。酶解后熱水浸提溫度確定為80℃，酶解后熱水浸提時間為90min，酶解后熱水浸提時的固液比為1：30，酶解后熱水浸提次數為一次。 實驗結果表明，利用酶解+熱水浸提法提取茯苓多糖，能顯著提高茯苓多糖的浸出率，是熱水浸提法的2,32倍，并且具有浸

3、提時間縮短，提取條件溫和，所得茯苓多糖立體結構不易被破壞、生物活性高等優(yōu)點。 3．乙醇沉淀工藝研究 通過實驗探討上述兩種方法的浸提液濃縮比和乙醇加量對多糖沉淀率的影響，結果表明熱水浸提液醇沉醇沉最佳工藝條件為濃縮液占原體積的1/10，乙醇濃度為80％時，沉淀率達到82.03％，沉淀中多糖的含量為20.16％。酶解+熱水浸提液醇沉醇沉最佳工藝條件為濃縮液占原體積的1/5，乙醇濃度為80％時，沉淀率達到83.15％，沉淀中多

4、糖的含量為29.13％。 4．除蛋白質方法的比較 本文比較了的Sevag法和酶解+Sevag法、10％三氯乙酸和鞣酸沉淀法去除茯苓多糖提取物中的蛋白質成分。綜合考慮蛋白質清除率和多糖損失率后確定采用酶解+Sevag法去除茯苓多糖提取物中的蛋白質。去蛋白后醇沉所得的多糖含量為：55．820／0。 5．大孔樹脂純化茯苓多糖 在9種大孔吸附樹脂中進行篩選確定用AB-8大孔吸附樹脂進行茯苓多糖的繼續(xù)純化。詳細研究

5、AB-8大孔吸附樹脂純化茯苓多糖的過程，確定條件為：洗脫速度：2ml/min，NaCl溶液濃度：0.2mg/ml。 6．茯苓多糖的DEAE-纖維素分離 取純化茯苓多糖上DEAE．纖維素柱，結果蒸餾水洗脫得一種中性多糖PPS1，0.1、0.2、0.3mol/LNaCl溶液分別洗脫得三種不同的酸性多糖PPS2、PPS3、PPS4。 7．茯苓多糖的單糖組分研究 采用氣相色譜法測定PPS2的單糖組分，結果表明主要