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1、重慶醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文PTEN缺失對(duì)抗氧化防御蛋白的影響效應(yīng)及機(jī)制研究姓名:茍巧申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:博士專業(yè):組織工程與細(xì)胞工程(腫瘤病理)指導(dǎo)教師:米粲20090501重慶醫(yī)科大學(xué)博士研究生學(xué)位論文流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)PTEN卜MEFs及PTEN,。MEFs細(xì)胞中基礎(chǔ)ROS(H202和02‘一)水平。(3)用丙二醛(MDA)檢測(cè)試劑盒比較PTEN一MEFs及PTEN以MEFs細(xì)胞中脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物MDA水平:免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)PTEN卜MEFs及P
2、TEN以MEFs細(xì)胞內(nèi)DNA氧化損傷產(chǎn)物8一羥基脫氧鳥(niǎo)苷(8OHdG)水平;Westernblot及免疫熒光染色檢測(cè)PTEN’一MEFs及PTEN乒MEFs細(xì)胞中DNADSBs產(chǎn)物yH2AX蛋白表達(dá)水平;中性彗星電泳進(jìn)一步檢測(cè)PTENHMEFs及PTEN乒MEFs細(xì)胞內(nèi)DNADSBs水平。(4)磷脂酰肌醇激酶(P13K)抑制劑LY294002作用PTEN“^MEFs細(xì)胞后,Westernblot檢測(cè)絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶AKT(或稱PK
3、B)磷酸化水平;Westernblot和Northernblot分別檢測(cè)LY294002作用后PTEN乒MEFs細(xì)胞中Prxl,2,5,6及Cu/ZnSOD蛋白和mRNA表達(dá)水平;Westernblot進(jìn)一步檢測(cè)PTEN卜MEFs及PTEN小MEFs細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄因子FOX03a磷酸化水平及LY294002作用PTEN“‘MEFs細(xì)胞后FOX03a磷酸化水平。結(jié)果:(1)PTEN缺失MEFs細(xì)胞抗氧化防御能力降低:PTEN“MEFs細(xì)胞的S
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