芪術(shù)藥對(duì)抗氧化協(xié)同機(jī)制的研究.pdf

1、傳統(tǒng)中草藥是我國(guó)功能食品的重要組成原料之一，已有幾千年的使用歷史。中草藥常以方劑配伍的形式應(yīng)用于功能食品中，很多中草藥在配伍使用時(shí)表現(xiàn)出比單獨(dú)使用更好的藥理功能。中藥藥對(duì)是復(fù)方的最小單位，是相對(duì)固定的兩味草藥的配伍形式，通常表現(xiàn)出藥效增加、互助、減弱、拮抗等作用。
　　 黃芪白術(shù)（芪術(shù)）藥對(duì)是醫(yī)家常用藥食兼用經(jīng)典藥對(duì)之一，在“芪術(shù)湯”和“補(bǔ)中益氣湯”等方中均有體現(xiàn)，具有輔助治療腎病、糖尿病等慢性疾病的作用。本文主要研究了芪術(shù)藥對(duì)

2、配伍前后乙醇提取物抗氧化能力和物質(zhì)基礎(chǔ)變化；研究了芪術(shù)藥對(duì)配伍前后揮發(fā)油抗氧化活性、抑菌能力和化學(xué)成分的變化。
　　 芪術(shù)藥對(duì)乙醇提取物體外抗氧化實(shí)驗(yàn)（清除ABTS·+自由基能力和總抗氧化能力FRAP）結(jié)果表明，芪術(shù)藥對(duì)配伍之后乙醇提取物存在抗氧化協(xié)同效應(yīng)。芪術(shù)藥對(duì)乙醇提取物物質(zhì)基礎(chǔ)的分析、鑒定采用HPLC-DAD-MS/MS聯(lián)用技術(shù)，通過HPLC技術(shù)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)芪術(shù)藥對(duì)乙醇提取物中有31個(gè)化合物，采用HPLC-DAD-MS/MS聯(lián)

3、用技術(shù)初步鑒定了其中的16個(gè)化合物。芪術(shù)藥對(duì)乙醇提取物中潛在抗氧化成分的篩選、鑒定采用HPLC-DPPH方法。結(jié)果表明，芪術(shù)藥對(duì)乙醇提取物中潛在抗氧化成分有11個(gè)，根據(jù)其UVλmax，MS，和/或MS/MS數(shù)據(jù)，初步鑒定出8個(gè)化合物，分別為：Ononin，9，10-dimethoxy-pterocarpan-3-O-β-D-glycoside，Claycosin，3’-hydroxy-5'-methoxyisoflavone-7-O-β

4、-D-glueopyranoside，F(xiàn)ormononetin，AtractylenolideⅡ，AtractylenolideⅥ和Daucosterol。芪術(shù)藥對(duì)配伍之后潛在抗氧化成分相對(duì)濃度比率分析顯示，配伍之后Ononin和Claycosin相對(duì)濃度比率顯著減?。≒<0.05），而component6，F(xiàn)ormononetin和AtractylenolideⅥ相對(duì)濃度比率顯著增大（P<0.05）。外標(biāo)法對(duì)Formononetin和

5、Ononin的定量結(jié)果顯示，配伍之后Formononetin濃度顯著增大（P<0.05），而Ononin濃度顯著減?。≒<0.05）。配伍之后這些潛在抗氧化成分濃度變化或許是引起芪術(shù)藥對(duì)乙醇提取物抗氧化活性增強(qiáng)的一個(gè)原因；另外，配伍過程中黃酮苷的水解可能是引起抗氧化活性增強(qiáng)的另外一個(gè)原因。
　　 芪術(shù)藥對(duì)揮發(fā)油體外抗氧化實(shí)驗(yàn)（清除DPPH自由基和ABTS·+自由基）和抑菌能力（抑制E.coli、M.luteus、B.subtil

6、is、S.aureus、C.albicans、A.niger和H.anomala）結(jié)果表明，芪術(shù)藥對(duì)配伍后揮發(fā)油在抗氧化能力和抑菌能力方面存在明顯的協(xié)同作用。通過GC-MS聯(lián)用技術(shù)分析了芪術(shù)藥對(duì)配伍前后揮發(fā)油物質(zhì)基礎(chǔ)變化。結(jié)果顯示，芪術(shù)藥對(duì)揮發(fā)油物質(zhì)基礎(chǔ)不僅僅是兩味藥的簡(jiǎn)單加和：其中33個(gè)化合物來自白術(shù)，8個(gè)化合物來自黃芪，并且新檢測(cè)到2個(gè)化合物：1，2，3，4，4a，5，6，8a-Octahydro-α，α，4a，8-tetramet

7、hyl-[2R-（2α，4aα，8aβ）]-2-naphthalenemethanol和Neoclovene oxide。芪術(shù)藥對(duì)揮發(fā)油中潛在活性物質(zhì)的篩選采用主成分回歸（PCR）的方法。結(jié)果顯示，有15個(gè)化合物對(duì)實(shí)驗(yàn)菌株（E.coli、M.luteus、B.subtilis、S.aureus、C.albicans、A.niger、和H.anomala）的抑制和清除DPPH和ABTS·+自由基有重要貢獻(xiàn)；另外還有8個(gè)化合物可能具有顯著清