鄰苯二甲酸(2-乙基已基)酯宮內(nèi)暴露致雌性子代生殖發(fā)育毒性及機(jī)制探討.pdf

1、目的：⑴建立胎兒期DEHP暴露動(dòng)物模型，觀察DEHP對(duì)子代青春期性成熟、性分化以及成年后生殖功能的影響。⑵從性激素水平、DNA遺傳學(xué)損傷兩方面，初步探討胎兒期 DEHP暴露對(duì)雌性子代生殖發(fā)育毒性作用機(jī)制。 方法：①建立胎兒期DEHP暴露的動(dòng)物模型：Wistar大鼠按體重隨機(jī)分為五組：玉米油溶劑對(duì)照組和1、250、750、1000 mg/kg DEHP染毒組，每組10只孕鼠，通過灌胃方式染毒至妊娠17天。②觀察母鼠一般狀況及妊娠結(jié)

2、局和子鼠一般發(fā)育情況。③雌性子代性發(fā)育的影響，包括性成熟（陰道開口、首次排卵時(shí)間），性分化（肛門生殖器距離、乳頭數(shù)觀察）兩部分。④雌性子代體成熟后觀察對(duì)其生殖功能的影響。⑤PND22子鼠斷奶，每窩隨機(jī)抽取1只子鼠，用全血單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)DEHP對(duì)子代DNA遺傳學(xué)損傷效應(yīng)。⑥PND66-72動(dòng)情周期觀察，處于動(dòng)情間期的子鼠，麻醉后心臟穿刺采血，用放射性免疫法測(cè)定血清性激素雌二醇（E2）與睪酮（T）含量。 結(jié)果：⑴母鼠和胎鼠一

3、般發(fā)育毒性觀察指標(biāo)包括：染毒期間體重增長(zhǎng)、每窩平均胎鼠數(shù)、雌雄性別比例、母鼠臟器系數(shù)；子鼠睜眼時(shí)間、斷奶時(shí)的臟器系數(shù)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)各實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組間均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，表明本研究所用的染毒劑量為較低水平，未觀察到明顯的母鼠和胎鼠一般發(fā)育毒性。⑵異常動(dòng)物百分率分別為62.50％、81.25％，對(duì)照組、1、250mg/kg組無此異常。同時(shí)250mg/kg染毒組子鼠性成熟提前（P<0.05），750、1000mg/kg組性成熟延后（P<0.01）。7

4、50、1000mg/kg組檢測(cè)到部分動(dòng)物陰道未開口現(xiàn)象，反映分化的指標(biāo)（肛門生殖器距離，乳頭數(shù)）未發(fā)現(xiàn)異常。⑶子代成年后發(fā)現(xiàn)750、1000mg/kg組陰道未開口的動(dòng)物狀況仍然持續(xù)，成為陰道閉鎖。各染毒組動(dòng)情周期正常。內(nèi)生殖器觀察發(fā)現(xiàn)750、1000 mg/kg組分別54.5％、55.0％動(dòng)物子宮積液，伴有子宮系數(shù)增高趨勢(shì)。750 mg/kg組可見腎、腦臟器系數(shù)明顯較對(duì)照組減小，其余臟器系數(shù)各實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。動(dòng)情周期未受

5、影響。⑷各實(shí)驗(yàn)組均未發(fā)現(xiàn)明顯的DNA損傷。彗星實(shí)驗(yàn)指標(biāo)：尾長(zhǎng)、尾距、尾部DNA百分含量、彗星率與對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。⑸血清E2，T濃度各實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。 結(jié)論：①建立宮內(nèi)DEHP暴露動(dòng)物模型，未觀察到明顯的母鼠和子鼠一般毒性。②妊娠中末期DEHP經(jīng)口染毒，可以引起雌性子代性發(fā)育異常，并能持續(xù)到成年階段，可能會(huì)影響其生殖功能。③妊娠中末期DEHP經(jīng)口染毒，未檢測(cè)到體內(nèi)激素及DNA遺傳學(xué)變化。但不