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1、目前從天然藥物中挖掘和尋找新的針對(duì)胰島素抵抗和2型糖尿病的藥物已成為國(guó)內(nèi)外的研究熱點(diǎn)。黃芪是中醫(yī)臨床上最常用的治療糖尿病的中藥之一,黃芪甲苷是中藥黃芪中的單體成份,本課題組前期工作發(fā)現(xiàn)黃芪甲苷可抑制脂肪細(xì)胞脂解,改善脂肪細(xì)胞的胰島素抵抗。那么,黃芪甲苷對(duì)胰島素敏感的其它外周組織,如人體最大器官的骨骼肌,是否也有作用呢?眾所周知,脂肪外組織特別是肌肉組織脂質(zhì)堆積是胰島素抵抗的重要因素,本研究應(yīng)用C2C12骨骼肌細(xì)胞模型來(lái)觀察黃芪甲苷對(duì)骨骼
2、肌細(xì)胞糖脂代謝的影響。 目的:培養(yǎng)C2C12骨骼肌細(xì)胞,觀察黃芪甲苷對(duì)骨骼肌細(xì)胞糖脂代謝的影響,探尋黃芪甲苷調(diào)節(jié)糖脂代謝的細(xì)胞和分子機(jī)制,更好地為黃芪甲苷防治2型糖尿病及其相關(guān)疾病提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)和臨床運(yùn)用指導(dǎo)。 方法: 在分化成熟的C2C12骨骼肌細(xì)胞中用棕櫚酸孵育16h,造體外胰島素抵抗模型,進(jìn)行3H-葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)測(cè)定,觀察黃芪甲苷對(duì)胰島素抵抗及非胰島素抵抗模型的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)的影響。應(yīng)用細(xì)胞膜蛋白分離方法觀察Glut
3、4的轉(zhuǎn)位,免疫印跡檢測(cè)胰島素信號(hào)通路關(guān)鍵蛋白Irb,IRS-1,Akt和與胰島素信號(hào)傳導(dǎo)密切聯(lián)系的NF-kB 炎癥通路中關(guān)鍵蛋白的活性變化。 結(jié)果: 1.黃芪甲苷呈劑量及時(shí)間依賴(lài)促進(jìn)C2C12骨骼肌細(xì)胞基礎(chǔ)及胰島素刺激下的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn),并可改善棕櫚酸誘導(dǎo)的C2C12骨骼肌細(xì)胞糖轉(zhuǎn)運(yùn)的下降。 2.黃芪甲苷可提高基礎(chǔ)及胰島素刺激下IRS-1和Akt的磷酸化水平,并拮抗棕櫚酸引起的磷酸化下降,但是對(duì)Irb磷酸化卻無(wú)影響;
4、黃芪甲苷可促進(jìn)基礎(chǔ)及胰島素刺激下的細(xì)胞Glut4由胞漿至胞膜的轉(zhuǎn)位,并可抑制棕櫚酸干預(yù)下Glut4轉(zhuǎn)位及表達(dá)的減少。 3.黃芪甲苷能抑制棕櫚酸引起的NF-kB通路中IKK的磷酸化程度升高及IkBα的降解,并可降低棕櫚酸導(dǎo)致的C2C12骨骼肌細(xì)胞TNFa,IL-6,MCP-1mRNA的表達(dá)增加。 4. 黃芪甲苷降低C2C12骨骼肌細(xì)胞的氧消耗。 5. 黃芪甲苷可促進(jìn)AMPK的磷酸化激活。 結(jié)論: 黃
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