黃芪甲苷對阿霉素誘導(dǎo)大鼠H9C2心肌細(xì)胞凋亡影響的實驗研究.pdf

1、目的:通過觀察黃芪甲苷對阿霉素誘導(dǎo)大鼠H9C2心肌細(xì)胞凋亡率、凋亡基因Bax、Bcl-2mRNA的表達(dá)及凋亡因子活性氧自由基(ROS)、線粒體膜電位(△Ψm)水平的影響，探討黃芪甲苷干預(yù)阿霉素誘導(dǎo)H9C2心肌細(xì)胞凋亡的作用機制。
　　方法:采用大鼠H9C2心肌細(xì)胞，選用不同濃度阿霉素(100ng/ml、250ng/ml、500ng/ml)作用于心肌細(xì)胞，篩查出最佳實驗濃度，建立阿霉素誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡模型;用黃芪甲苷低、中、高劑量組(1

2、0ug/ml、25ug/ml、50ug/ml)作用于模型細(xì)胞，選出實驗用黃芪甲苷濃度;將實驗細(xì)胞隨機分為空白對照組、模型組和黃芪甲苷組，給藥后用AnnexinⅤ/PI染色流式細(xì)胞儀測定三組細(xì)胞的凋亡百分比，RT-PCR法檢測心肌細(xì)胞Bax、Bc l-2 mRNA的表達(dá)水平，利用流式細(xì)胞儀檢測H9C2心肌細(xì)胞中活性氧自由基(ROS)、線粒體膜電位(△Ψm)水平。
　　結(jié)果:1.心肌細(xì)胞的凋亡百分比:與正常對照組(39.72％)比較，

3、模型組(91.06％）心肌細(xì)胞的凋亡百分比明顯增大;與模型組比較，黃芪甲苷組(60.01％)心肌細(xì)胞的凋亡百分比顯著減少。2.心肌細(xì)胞凋亡基因Bax、Bcl-2 mRNA的表達(dá):Bax mRNA:與正常對照組(1.36±0.31)相比，模型組(3.01±1.43)表達(dá)明顯升高;與模型組相比，黃芪甲苷組(1.86±0.32)表達(dá)明顯降低(P＜0.05)。Bcl-2 mRNA:與正常組(0.76±0.22)比較，模型組(1.20±0.38)

4、表達(dá)升高;與模型組比較，黃芪甲苷組(1.81±0.25)表達(dá)明顯升高(P＜0.01)。3.心肌細(xì)胞ROS升高的百分比:與正常組(16.09％)比較，模型組(63.35％)ROS升高的百分比顯著增加;與模型組比較，黃芪甲苷組(28.81％) ROS升高的百分比明顯減少。4.心肌細(xì)胞△Ψm降低的百分比:與正常組(26.40％)比較，模型組(51.13％)△Ψm降低的百分比顯著增加;與模型組比較，黃芪甲苷組(35.46％)△Ψm降低的百分比明