復方感冒合劑對孕鼠胚胎發(fā)育毒性實驗研究.pdf

1、目的： 為了系統(tǒng)地研究復方感冒合劑的安全性，指導孕婦臨床合理用藥，本實驗在SD孕鼠胚胎器官形成期給藥，探討復方感冒合劑對孕鼠的胚胎發(fā)育毒性。 方法： 將健康未交配的SD大鼠75只，雌性50只，雄性25只，于每天晚上18：00按照雌雄2：1的比例進行合籠交配，次日對雌鼠進行陰栓檢查，對同籠未發(fā)現(xiàn)陰栓的雌鼠作陰道分泌物涂片，檢查有無精子細胞，凡查見精子提示已交配成功。懷孕當天記為孕0天。將孕鼠隨機分為5組，即復方感冒

2、合劑高、中、低劑量組、陰性對照組和陽性對照組，(以下依次稱為A、B、C、D、E組)。A、B、C組分別于大鼠受孕第7-16d連續(xù)灌胃給予復方感冒合劑相當于生藥劑量13.0g/kg、6.5g/kg、3.3g/kg；同期D組給予等劑量的生理鹽水；陽性對照組給予等劑量復方鹽酸偽麻黃堿緩釋膠囊，即新康泰克(按300mg偽麻黃堿/kg孕鼠體重算)，給藥體積均為10ml/kg。于妊娠第0天開始，每3天稱一次孕鼠的體重，觀察藥物對孕鼠體重的影響，并跟據(jù)

3、體重變化調(diào)整給藥劑量。所有孕鼠在受孕第20天處死，進行胚胎毒性效應研究。記錄每只孕鼠子宮胎盤重量，子宮胎鼠胎盤總重。仔細檢查并記錄活胎數(shù)、死胎數(shù)和吸收胎數(shù)。逐一測量活胎鼠的體重、身長、尾長，并檢查活胎外觀有無異常。每窩50％的活胎鼠經(jīng)茜素紅和阿利新藍骨骼雙染后檢查全身骨骼發(fā)育情況。50％活胎鼠用Bouin液浸泡后做內(nèi)臟檢查。 結(jié)果： 1．復方感冒合劑對孕鼠一般情況的影響A、B、C組孕鼠給藥后外觀體征、行為活動、糞便性狀沒

4、有觀察到明顯異常變化，三組孕鼠增重與D組比較，F(xiàn)=0.035，F(xiàn)0.05(3，36)=2.77，F(xiàn)＜F0.05(3，36)，P＞0.05，差異無統(tǒng)計學意義。E組孕鼠給藥后第2天開始出現(xiàn)活動和飲食減少，大便干燥等變化，停藥2天后開始恢復，與D組比較孕鼠體重增加明顯減慢，t=3.763，t0.05(18)=2.101，t0.01(18)=2.878，t＞t0.01(18)，P＜0.01，差異有顯著性意義。 2．復方感冒合劑對孕鼠生殖

5、能力的影響A、B、C各組孕鼠子宮胎盤重量與D組比較，F(xiàn)=0.026，F(xiàn)0.05(3，36)=2.77，F(xiàn)＜F0.05(3，36)，P＞0.05，差異無統(tǒng)計學意義。A、B、C各組孕鼠子宮胎鼠胎盤總重與D組比較，F(xiàn)=0.00054，P＞0．05，差異無統(tǒng)計學意義。A、B、C各組孕鼠吸收胎數(shù)、活胎數(shù)、死胎數(shù)與D組比較，X2=3.9，X20.05(6)=12.95，X2＜X20.05(6)，P＞0.05，差異無統(tǒng)計學意義。E組孕鼠子宮胎盤重量、

6、子宮胎鼠胎盤總重明顯降低，與D組比較，t值分別為3.27、2.945，均大于t0.01(18)=2.878，P＜0.01，差異有顯著性意義。E組活胎數(shù)減少，吸收胎和死胎數(shù)增多，與D組比較，X2=11.9，X20.05(2)=5.99，X20.01(2)=9.21，X2＞X20.01(2)，P＜0.01，差異有顯著性意義。 3．復方感冒合劑對胎鼠生長發(fā)育的影響A、B、C組胎鼠的體重與D組比較t值分別為：1.588、-1.716、1

7、.094，體長與D組比較t值分別為：0.883、0、0.413，尾長與D組比較，t值分別為：1.626、1.186、1.140，以上結(jié)果所對應的P值均大于0.05，差異無統(tǒng)計學意義。E組與D組比較胎鼠的體重明顯降低，體長和尾長明顯縮短，與D組比較，t值分別為3.20、3.491、3.123，所對應的P值均小于0.01，差異有顯著性意義。 4．復方感冒合劑對胎鼠外觀的影響身體外形異常表現(xiàn)為露腦、額裂、臍疝、腹裂、畸形足、短尾、無尾

8、等。A、B、C、D、E各組胎鼠均未見露腦、額裂、腹裂、畸形足、無尾等外觀變化。臍疝、短尾等變化的總發(fā)生率分別為：A組：2.44％；B組：2.30％；C組：1.16％；D組：2.22％；E組：14.86％。A、B、C組與D組比較，X2=2.27，X20.05(3)=7.81，X2＜X20.05(3)，P＞0.05，差異無統(tǒng)計學意義。E組與D組比較，X2=-5.73，X20.05(1)=3.84，X2＞X20.05(1)，P＜0.05，差異

9、有統(tǒng)計學意義。 5．復方感冒合劑對胎鼠骨骼的影響A、B、C組胎鼠骨骼總變異及畸形率與D組比較，X2=0.34，X20.05(3)=7.81，X2＜X20.05(3)，P＞0．05，差異無統(tǒng)計學意義。E組胎鼠除有波狀肋和骨骼發(fā)育遲緩外，還發(fā)現(xiàn)較多骨骼畸形，表現(xiàn)為椎體分離、椎體分裂(椎骨椎體中心軟骨分裂)、肋缺失、頸肋、腰肋等。其總變異及畸形率與D組比較，X2=7.27，X20.05(1)=3.84，X20.01(1)=6.63，X

10、2＜X20.01(1)，P＜0．01，差異有顯著性意義。 6．復方感冒合劑對胎鼠內(nèi)臟的影響A、B、C組胎鼠散在出現(xiàn)胸腺頸部殘留、腎盂積水等內(nèi)臟畸形，三組總畸形率與D組比較，X2=1.22，X20.05(3)=7.81，X2＜X20.05(3)，P＞0．05，差異無統(tǒng)計學意義。E組胎鼠出現(xiàn)較多內(nèi)臟畸形，如胸腺頸部殘留、突眼、腎盂積水、腦室擴張等，總畸形率與D組比較，X2=6.97，X20.05(1)=3.84，X20.01(1)=

11、6.63，X2＞X20.01(1)，P＜0.01，差異有顯著性意義。 結(jié)論： 綜合以上結(jié)果發(fā)現(xiàn)：在本實驗室條件下，復方感冒合劑高、中、低劑量在孕鼠致畸敏感期灌胃給藥，各劑量均無明顯母體毒性、胚胎毒性和致畸作用，且在實驗劑量范圍內(nèi)，復方感冒合劑未呈現(xiàn)劑量反應關系。通過陰性對照組的結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)在無任何外因干預的情況下胎鼠也有出現(xiàn)一定比例變異和畸形的可能。陽性對照組出現(xiàn)明顯的母體毒性、胚胎毒性和致畸作用。因此，為避免對胚胎發(fā)育