脂聯(lián)素及其受體在大腸癌組織中的表達及對HT-29細胞增殖和遷移的影響.pdf

1、脂聯(lián)素(ADP)是脂肪細胞分泌的一種脂肪細胞因子，由Scherer等于1995年首先從鼠的脂肪細胞分離出來，1999年Arita等將其命名為脂聯(lián)素。因為脂聯(lián)素是一種脂肪細胞因子，所以開始的研究集中于其對肥胖和糖尿病的作用方面。研究顯示脂聯(lián)素血漿濃度決定于腹部脂肪含量，脂聯(lián)素可能是聯(lián)系腹型肥胖、胰島素抵抗及致動脈粥樣硬化血脂譜中的內(nèi)在因素。后來的研究發(fā)現(xiàn)脂聯(lián)素水平與一些腫瘤具有相關(guān)性，臨床流行病學(xué)研究資料發(fā)現(xiàn)，低脂聯(lián)素水平是增加患大腸癌、

2、乳腺癌、胃癌和前列腺癌的危險性的獨立因素，同時脂聯(lián)素受體的低表達也與大腸癌發(fā)生發(fā)展相關(guān)。我們運用免疫組化實驗檢驗脂聯(lián)素及脂聯(lián)素受體在大腸癌組織中的表達情況，并應(yīng)用MTT實驗來驗證脂聯(lián)素對結(jié)腸癌HT-29細胞的增殖的影響，運用“劃痕”法遷移實驗驗證脂聯(lián)素對結(jié)腸癌HT-29細胞的遷移的影響，運用流式細胞學(xué)檢測脂聯(lián)素對結(jié)腸癌HT-29細胞周期的影響。
　　 目的:研究脂聯(lián)素受體及脂聯(lián)素在大腸癌組織中的表達情況及意義，人脂聯(lián)素重組體對人

3、結(jié)腸癌HT-29細胞體外增殖及遷移能力的影響。
　　 方法:1、應(yīng)用免疫組織化學(xué)SABC法檢測77例大腸癌組織中脂聯(lián)素受體與脂聯(lián)素的表達。2、將HT-29細胞分為對照組和脂聯(lián)素重組體實驗組(2.5，5，10，15μg/mL)，用脂聯(lián)素重組體作用一定時間后，分別以MTT法、細胞劃痕法和流式細胞學(xué)實驗檢測脂聯(lián)素重組體對大腸癌細胞增殖、遷移能力、細胞周期的影響。
　　 結(jié)果:免疫組化實驗發(fā)現(xiàn)，大腸癌組織中脂聯(lián)素受體及脂聯(lián)素表達

4、較正常大腸組織明顯減少，AdipoR1、AdipoR2和ADP的表達都與浸潤深度相關(guān)(P＜0.05);AdipoR1及ADP陽性表達率與浸潤深度T分級呈顯著負相關(guān)性（r=-0.237P=0.038，r=-0.469P=0.000）。AdipoR1、AdipoR2及ADP的表達與大腸癌有無淋巴轉(zhuǎn)移相關(guān)(P＜0.05);且AdipoR1及ADP陽性表達率與淋巴轉(zhuǎn)移呈負相關(guān)性（r=-0.237P=0.038，r=-0.231P=0.043）。

5、AdipoR1的表達與有無淋巴轉(zhuǎn)移相關(guān)(P＜0.05);AdipoR2及ADP的表達與大腸癌淋巴轉(zhuǎn)移無明顯相關(guān)性。
　　 通過MTT測定，發(fā)現(xiàn)脂聯(lián)素重組體能顯著降低HT-29細胞體外增殖和遷移能力(P＜0.01)，此作用具有濃度依賴性，從而進一步證明了脂聯(lián)素可以抑制大腸癌細胞的惡性增殖;劃痕試驗證實，脂聯(lián)素抑制大腸癌細胞的遷移，并且與濃度大小成正比，證明脂聯(lián)素可以降低大腸癌細胞的運動能力，抑制腫瘤細胞遷移，從而抑制腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移

6、;流式細胞儀檢測結(jié)果表明脂聯(lián)素重組體作用后G1期細胞比例增加，而S期細胞比例降低，各種濃度組與對照組比較差異均有顯著性(P＜0.01)，且隨著脂聯(lián)素重組體作用濃度增加G1期細胞比例越高，而S期細胞比例越低，表明脂聯(lián)素可以將大腸癌細胞分裂阻滯在G1期，抑制細胞分裂增殖。
　　 結(jié)論:脂聯(lián)素受體及脂聯(lián)素在大腸癌組織中的表達較正常大腸組織顯著減少，兩者的表達與大腸癌的浸潤及轉(zhuǎn)移呈明顯負相關(guān)性，脂聯(lián)素與脂聯(lián)素受體的表達呈正相關(guān);脂聯(lián)素可