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文檔簡介
1、目的：利用基因轉(zhuǎn)染和RNA干擾技術(shù),在大腸癌HT-29細(xì)胞株中建立Livin基因沉默體系,探討其在誘導(dǎo)HT-29細(xì)胞凋亡及抑制細(xì)胞增殖方面的作用。
方法：將化學(xué)合成的Livin siRNA轉(zhuǎn)染HT-29細(xì)胞株,RT-PCR測定轉(zhuǎn)染前后Livin mRNA的表達(dá)水平,流式細(xì)胞儀檢測轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞凋亡率的變化,MTT法觀察Livin siRNA轉(zhuǎn)染HT-29細(xì)胞抑制細(xì)胞增殖的生物學(xué)行為。
結(jié)果：轉(zhuǎn)染Livin siRNA沉
2、默效果最明顯的是001鏈,LivinɑmRNA/β-actin mRNA表達(dá)水平的比值在24h時(shí)陰性對照組與Livin_001組相比較由0.55下降到0.29,48h表達(dá)量由0.56下降到0.31,Livin_001組24h和48h凋亡率分別為25.14％和19.04%,與對照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05),細(xì)胞增殖抑制率在Livin_001 siRNA濃度為50nM時(shí),24h抑制率為25.19%,48h抑制率為20.96%,均與對
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