含ITIM模體的抑制性受體在器官移植免疫調(diào)節(jié)中的作用.pdf

1、[目的]：探討含有免疫受體酪氨酸抑制基序(immunoreceptortyrosine-based inhibition motif，ITIM)的抑制性受體：細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞抗原-4(cytotoxic T lymphocyte associated antigen-4，CTLA-4，CD152)，B、T淋巴細(xì)胞衰減因子(B and T lymphocyte attenuator，BTLA，CD272)，程序性死亡分子-1(progra

2、mmed death-1，PD-1，CD279)，白細(xì)胞相關(guān)免疫球蛋白樣受體-1(leukocyte-associated immunoglobulin-like receptor-1，LAIR-1，CD305)，白細(xì)胞相關(guān)免疫球蛋白樣受體-2(leukocyte-associatedimmunoglobulin-like receptor-2，LAIR-2，CD306)在器官移植免疫調(diào)節(jié)中的作用。 [方法]：1．建立小鼠頸部心

3、臟異位移植模型(C57/BL6為受者，BalB/C為供者)，按照移植物是否發(fā)生排斥反應(yīng)分為排斥組和對(duì)照組，對(duì)其脾臟淋巴細(xì)胞表面的CD272、CD279進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)檢測。2．對(duì)臨床上處于不同免疫狀態(tài)的移植受者(腎移植急性排斥、腎移植功能延遲恢復(fù)、肝移植急性排斥、規(guī)律血透/血濾、移植腎功能穩(wěn)定)血清中的可溶性sCD305、CD306進(jìn)行ELISA檢測。3．對(duì)腎移植后并發(fā)巨細(xì)胞病毒肺炎以及腎移植后恢復(fù)順利(對(duì)照組)的患者血清內(nèi)sCD305、

4、CD306進(jìn)行ELISA檢測。4．對(duì)小鼠模型脾淋巴細(xì)胞mCD152進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)檢測(分組同1)，同時(shí)對(duì)臨床上處于不同免疫狀態(tài)的器官移植受者(分組同2)以及正常人血清內(nèi)sCD152進(jìn)行ELISA檢測。5．將上述各組結(jié)果進(jìn)行轉(zhuǎn)換并驗(yàn)證滿足正態(tài)分布后，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 [結(jié)果]：1．小鼠移植模型排斥組CD272陽性率(58.194±8.692)％，CD279為(5.250±5.550)％；對(duì)照組CD272陽性率(43.582±7.5

5、84)％，CD279陽性率不符合正態(tài)分布，波動(dòng)于(0.390-67.750)％。兩組CD272陽性表達(dá)率存在顯著性差異(P=0.0000)，而CD279無明顯差異(P=0.0863)。2．規(guī)律血透/血濾組sCD305濃度(0.845-54.415)ng/ml，CD306為(0.000-0.011)ng/ml；移植腎功能穩(wěn)定組sCD305為(0.000-5.942)ng/ml，CD306為(0.000-0.041)ng/ml；腎移植急性排

6、斥組sCD305為(0.201-50.432)ng/ml，CD306為(0.002-0.045)ng/ml；肝移植急性排斥組sCD305為(0.452-44.906)ng/ml，CD306為(0.000-0.042)ng/ml；移植腎延遲恢復(fù)組sCD305為(0.000-6.838)ng/ml，CD306為(0.001-0.085)ng/ml。移植腎功能穩(wěn)定組sCD305表達(dá)水平與規(guī)律血透/血濾組、腎移植急性排斥組、肝移植急性排斥組及腎

7、移植延遲恢復(fù)組相比，均明顯處于較低水平(P＜0.05)；規(guī)律血透/血濾組sCD305表達(dá)與移植腎功能穩(wěn)定組、腎移植急性排斥組、肝移植急性排斥組及移植腎延遲恢復(fù)組相比均處于較高水平(P＜0.05)；sCD305在其他各組之間的表達(dá)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.1)，而各組的CD306表達(dá)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。3．巨細(xì)胞肺炎組與對(duì)照組相比，sCD305的表達(dá)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.3158)，CD306的表達(dá)明顯低于對(duì)照組(P=0.0002)

8、。4．小鼠移植模型排斥組與對(duì)照組淋巴細(xì)胞表面CD152的表達(dá)陽性率無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.4803)。而臨床移植腎功能穩(wěn)定組和移植腎急性排斥組CD152陽性率均低于移植腎延遲恢復(fù)組和正常對(duì)照組(P＜0.05)。 [結(jié)論]：含有ITIM的抑制性受體CD152、CD272、CD279、CD305、CD306在移植免疫中都發(fā)揮著重要的作用。CD152、CD279、CD272在T細(xì)胞表面表達(dá)的時(shí)間不同，CD152表達(dá)出現(xiàn)的時(shí)間較早，CD2

9、79最晚。推測它們的表達(dá)在T細(xì)胞活化后都有變化，且都遵循相似的規(guī)律：先升高，然后大量的分子與配體結(jié)合，發(fā)揮抑制性作用，使表達(dá)數(shù)量迅速下降，最后再逐步恢復(fù)到T細(xì)胞活化前的水平。CD305和CD306這兩個(gè)分子中，真正發(fā)揮抑制性作用的是CD305，對(duì)sCD305進(jìn)行檢測，可以提示臨床移植受者是否正在遭遇不良事件，可以對(duì)移植物功能的恢復(fù)情況作出預(yù)判；CD306的主要功能是通過競爭性結(jié)合它們的共同配體，使得CD305與配體結(jié)合數(shù)目減少，從而間接

10、發(fā)揮調(diào)節(jié)CD305抑制性功能的作用，CD306的檢測可以彌補(bǔ)CMV抗原-PP65檢測診斷巨細(xì)胞肺炎的主觀性過強(qiáng)的缺點(diǎn)，將大大增加臨床CMV肺炎早期診斷的準(zhǔn)確性。推測在機(jī)體需要提高免疫應(yīng)答強(qiáng)度時(shí)，CD306通過表達(dá)數(shù)量的升高，來結(jié)合更多的配體，從而減少CD305與配體結(jié)合的數(shù)量，使CD305對(duì)T細(xì)胞的抑制作用減弱，提高免疫應(yīng)答的強(qiáng)度；需要降低免疫應(yīng)答強(qiáng)度時(shí)，會(huì)有更多的可溶性的sCD305形成，這些可溶性分子進(jìn)入循環(huán)中，更多地與配體結(jié)合，發(fā)