大豆異黃酮聯(lián)合長春瑞濱對兔VX2腫瘤模型影響的實驗研究.pdf

1、[目的]1．觀察大豆異黃酮聯(lián)合長春瑞濱對兔VX2腫瘤組織皮下移植瘤模型的干預作用，并探討腫瘤發(fā)生時氧化與抗氧化失衡的相互關系；2．建立兔VX2腫瘤細胞肺移植瘤模型，并觀察其生物學特性與腫瘤生長的關系。 [方法]1．采用兔VX2腫瘤組織懸液種植法(由中國第四軍醫(yī)大學附屬唐都醫(yī)院介入放射科張洪新副教授提供)在18只日本大耳白兔右側后腿皮下建立VX2腫瘤組織皮下移植瘤模型。將模型制備成功后的18只日本大耳白兔隨機分成3組，每組6只，分

2、別為對照組(A組)；實驗動物以基礎飼料及自來水喂養(yǎng)；長春瑞濱干預組(B組)：實驗動物以基礎飼料及自來水喂養(yǎng)，并于種植VX2腫瘤組織懸液后第15天按205 mg/只劑量沿耳緣靜脈注射長春瑞濱干預，第22天按2.0mg/只劑量沿耳緣靜脈注射長春瑞濱干預；長春瑞濱聯(lián)合大豆異黃酮干預組(C組)：實驗動物除按B組劑量給予長春瑞濱干預外，從種植VX2腫瘤組織懸液后第8天開始在基礎飼料中按50 mg/kg/只/天劑量添加大豆異黃酮干預。全部實驗動物從

3、種植VX2腫瘤組織懸液1周后開始每周測量其右側后腿皮下移植瘤的長徑(a)和短徑(b)，計算并比較瘤體生長率(tumor-growth rate，TGR)。于種植VX2腫瘤組織懸液第30天采血制備血漿檢測超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)含量，并處死動物觀察腫瘤轉移情況。2．無菌操作制備兔VX2腫瘤單細胞懸液，6只日本大耳白兔在清醒狀態(tài)下分別沿右側腋后線第7肋間注入活細胞數(shù)為1×10<'7>/ml的VX2腫瘤細胞懸液0.1 m

4、l建立兔VX2腫瘤細胞肺移植瘤模型。觀察實驗動物生存期及腫瘤生成率，并采用免疫組織化學方法檢測腫瘤組織中凋亡相關基因bcl-2、bax蛋白的表達情況。 [結果]1.18只日本大耳白兔于右后腿皮下種植VX2腫瘤組織懸液1周后均在注射部位形成可觸及的實體瘤，成功率為100％。未發(fā)現(xiàn)兔VX2腫瘤組織后腿皮下移植瘤發(fā)生遠處組織器官轉移。2.兔VX2腫瘤組織皮下移植瘤模型動物在種植VX2腫瘤組織懸液第2周時喂飼大豆異黃酮的C組實驗動物皮

5、下移植瘤生長率較A組明顯降低，P<0.01。第2周開始應用長春瑞濱干預后，B組實驗兔皮下移植瘤生長率較A組降低，P<0.05； C組瘤體生長率較B組降低，P<0.05，較A組明顯降低P<0.01。第3周應用長春瑞濱第2次干預后，B組及C組實驗動物的皮下移植瘤生長率均較A組明顯降低，P<0.01；C組實驗動物的皮下移植瘤生長率低于B組，但差異不顯著，P>0，05。3.與A組比較：B組實驗兔血漿MDA含量明顯升高，P<0.01，SOD活力明

6、顯降低，P<0.01；與B組比較：c組實驗兔血漿MDA含量下降，P<0.05，SOD活力升高P<0.05。4.兔VX2腫瘤細胞肺移植瘤原位成瘤率為83.33％(5/6)，生存期為35.4±3.78天。腫瘤組織可侵犯周邊組織器官并發(fā)生遠處器官轉移。5.5例兔VX2腫瘤細胞肺移植瘤模型腫瘤組織中Bcl-2蛋白陽性表達4例(80％)，Bax蛋白陽性表達1例(20％)，二者陽性表達率比較未見顯著性差異，P>0.05。5例兔VX2腫瘤細胞肺移植瘤

7、模型腫瘤組織中Bcl-2和Bax蛋白均陽性表達1例，均陰性表達1例。 [結論]1.按50 mg/kg/只/天的劑量在飼料中添加大豆異黃酮可以抑制兔VX2腫瘤組織皮下移植瘤的生長，從而驗證了大豆異黃酮的抗腫瘤作用。2.按50mg/kg/只/天的劑量在飼料中添加大豆異黃酮與長春瑞濱聯(lián)合應用，具有協(xié)同抑制兔VX2腫瘤組織皮下移植瘤生長的作用。3.實驗兔應用長春瑞濱干預后可能由于發(fā)生了血液毒性反應而導致肺部感染，繼而使其體內出現(xiàn)過氧化損