經(jīng)前舒顆粒對郁怒大鼠不同腦區(qū)5-HTR3B表達(dá)和5-HT含量的影響.pdf

1、目的:通過復(fù)制大鼠郁怒情緒模型,并以調(diào)肝中藥經(jīng)前舒顆粒進(jìn)行干預(yù),分析郁怒狀態(tài)下下丘腦、海馬、頂區(qū)皮質(zhì)、額區(qū)皮質(zhì)中5-HTR3B的表達(dá)變化及5-HT含量的改變,探討郁怒情緒的微觀機(jī)制,并進(jìn)一步探討調(diào)肝方藥經(jīng)前舒顆粒的干預(yù)作用機(jī)制,為經(jīng)前舒顆粒調(diào)肝解郁的機(jī)制提供新的理論依據(jù)。方法:采用社會隔離加居住入侵方法制備郁怒情緒大鼠模型,以調(diào)肝方藥經(jīng)前舒顆粒進(jìn)行藥物干預(yù)。通過曠場實(shí)驗(yàn)、糖水偏好實(shí)驗(yàn)對大鼠模型進(jìn)行評價(jià)。對大鼠進(jìn)行社會隔離實(shí)驗(yàn)后行居住入侵

2、實(shí)驗(yàn)5天后,依據(jù)中位數(shù)統(tǒng)計(jì)法分出憤怒組和郁怒組大鼠,并將郁怒組大鼠隨機(jī)分為郁怒模型組和郁怒給藥組,郁怒模型組大鼠在造模的同時(shí)灌胃給予滅菌飲用水,郁怒給藥組大鼠在造模的同時(shí)灌胃給予經(jīng)前舒顆粒,并設(shè)正常對照組。兩周后大鼠斷頭取材,與冰上迅速分離海馬、下丘腦、額區(qū)皮質(zhì)、頂區(qū)皮質(zhì),運(yùn)用RT-PCR、western-blot檢測各腦區(qū)的5-HTR3B的表達(dá),運(yùn)用HPLC-FLU檢測各腦區(qū)的5-HT的含量的變化。結(jié)果:行為學(xué)評價(jià)結(jié)果曠場實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),造

3、模一周后郁怒模型組得分顯著高于正常對照組(P＜0.01);糖水偏好實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),郁怒模型組糖水偏好系數(shù)與正常對照組比較顯著降低(P＜0.01)。而用藥一周后,發(fā)現(xiàn)郁怒給藥組曠場實(shí)驗(yàn)得分與郁怒模型組比較顯著降低(P＜0.05),而與正常對照組比較則無顯著性差異(P＞0.05);糖水偏好實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),郁怒給藥組糖水偏好系數(shù)與郁怒模型組比較有顯著升高(P＜0.05),與正常對照組比較則無顯著差異(P＞0.05)。RT-PCR和Western-blot

4、結(jié)果:郁怒模型組大鼠下丘腦、海馬、頂區(qū)皮質(zhì)、額區(qū)皮質(zhì)5-HTR3B的mRNA水平和蛋白表達(dá)水平較正常對照組都顯著的升高(P＜0.01);郁怒給藥組這四個腦區(qū)5-HTR3B的mRNA水平和蛋白表達(dá)水平較模型組有顯著的下降(P＜0.01),與正常組比較則無顯著性差異(P＞0.05)。高效液相-熒光檢測法結(jié)果:郁怒模型組大鼠下丘腦、額區(qū)皮質(zhì)、海馬、頂區(qū)皮質(zhì)5-HT含量與正常組比較有顯著降低(P＜0.01)。郁怒給藥組大鼠下丘腦、額區(qū)皮質(zhì)、海馬

5、、頂區(qū)皮質(zhì)5-HT含量與郁怒模型組比較有顯著的升高(P＜0.01),與正常對照組比較這四個腦區(qū)5-HT含量則無顯著性差異(P＞0.05)。結(jié)論:用社會隔離加居住入侵方法可有效的制備郁怒情緒大鼠模型,曠場實(shí)驗(yàn)和糖水偏好實(shí)驗(yàn)對動物模型可作出有效的評價(jià)。大鼠不同腦區(qū)內(nèi)5-HT含量變化和5-HT3B受體的表達(dá)變化與郁怒情緒密切相關(guān)。頂區(qū)皮質(zhì)、額區(qū)皮質(zhì)、海馬、下丘腦中5-HT含量的降低和5-HT3B受體表達(dá)的升高可能是郁怒情緒的重要的微觀機(jī)制之一