迷迭香吸嗅對(duì)血管性癡呆大鼠學(xué)習(xí)記憶及海馬內(nèi)5-HT和GABA含量的影響.pdf

1、目的
　　本實(shí)驗(yàn)采用改良的雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎法建立血管性癡呆大鼠模型,觀察迷迭香吸嗅后血管性癡呆大鼠學(xué)習(xí)記憶功能的改善情況;并通過免疫組化法檢測(cè)迷迭香吸嗅后實(shí)驗(yàn)大鼠海馬內(nèi)5-HT和GABA含量的變化情況,初步探討迷迭香吸入的作用機(jī)制及臨床應(yīng)用價(jià)值。
　　方法
　　1.VD大鼠模型制備:將健康的SD大鼠用改良的2VO法造成VD模型,即先結(jié)扎左側(cè)頸總動(dòng)脈,1周后用同樣的方法結(jié)扎右側(cè)頸總動(dòng)脈。
　　2.模型大鼠水迷宮篩查

2、:手術(shù)后4周時(shí),初步篩選并存活的模型大鼠16只,正常大鼠和假手術(shù)大鼠各8只。通過Morris水迷宮測(cè)定24只大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶成績(jī),記錄定位航行實(shí)驗(yàn)中大鼠找到安全平臺(tái)的時(shí)間(即逃避潛伏期)和空間探索實(shí)驗(yàn)中大鼠穿越原平臺(tái)所在位置的次數(shù)(即穿臺(tái)次數(shù))為實(shí)驗(yàn)指標(biāo),時(shí)間均以120s為限。
　　2.分組及給藥:將造模成功的大鼠隨機(jī)分為模型組和迷迭香組,另設(shè)正常組和假手術(shù)組對(duì)照。
　　(1)迷迭香組(n=8):每天上、下午分別予以1％濃

3、度的迷迭香吸嗅,每次30min;
　　(2)VD模型組(n=8):使用蒸餾水替迷迭香精油,其他同迷迭香組;
　　(3)假手術(shù)組(n=8):假手術(shù)組分離出2側(cè)頸總動(dòng)脈但不予結(jié)扎,余實(shí)驗(yàn)步驟同VD模型組;
　　(4)正常組(n=8):不做任何手術(shù)處理,余實(shí)驗(yàn)步驟同模型組。
　　3.神經(jīng)行為學(xué)和形態(tài)學(xué)觀察
　?、僭谟盟幒?周時(shí),再次使用Morris水迷宮測(cè)定大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶成績(jī),水迷宮實(shí)驗(yàn)的方法同前。②在神經(jīng)行

4、為學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,將全部大鼠斷頭取腦,制作石蠟切片,進(jìn)行HE染色觀察大鼠海馬區(qū)的病理形態(tài)學(xué)變化,再用免疫組化法觀察大鼠海馬區(qū)5-HT和GABA含量的變化情況。
　　結(jié)果：
　　1.術(shù)后4周時(shí),手術(shù)組的逃避潛伏期明顯長(zhǎng)于正常組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);穿臺(tái)次數(shù)顯著少于正常組,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);假手術(shù)組和正常組相比,潛伏期與穿臺(tái)次數(shù)均無明顯差異(P>0.05)。
　　2.用藥5周時(shí),迷迭香吸嗅組

5、的逃避潛伏期短于模型組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);穿臺(tái)次數(shù)顯著多于模型組(P<0.05)。模型組大鼠的逃避潛伏期明顯長(zhǎng)于正常組,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);穿臺(tái)次數(shù)顯著少于正常組,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　3.免疫組化結(jié)果中,模型組的5-HT和GABA的陽性神經(jīng)元較正常組明顯減少(P<0.05),與模型組比較,迷迭香吸嗅組的陽性神經(jīng)元數(shù)明顯增多(P<0.05)。
　　結(jié)論
　　1.改