銀杏葉提取物對(duì)大鼠糖尿病腎病的防治作用.pdf

1、目的:觀察銀杏葉提取物(extract of ginkgo biloba,GBE)對(duì)大鼠糖尿病腎病(diabetic nephropathy，DN)的防治作用并探討其作用機(jī)制。 方法:雄性SD大鼠隨機(jī)取14只為正常組，其余一次性腹腔注射鏈脲霉素(streptozotocin，STZ)60 mg/kg誘導(dǎo)糖尿病模型。成模的糖尿病大鼠分為5組：DN病理組；GBE低劑量治療組(GL組，劑量為50 mg/kg)；GBE中劑量治療組(GM

2、組，劑量為100 mg/kg)；GBE高劑量治療組(GH組，劑量為200 mg/kg)；卡托普利對(duì)照組(劑量為10 mg/kg)，療程12周。葡萄糖氧化酶法測(cè)定空腹血糖；親和層析法測(cè)定糖化血紅蛋白(glycosylated hemoglobin，HbAlC)；化學(xué)比色法測(cè)定24 h尿蛋白、血尿素氮(blood urea nitrogen，BUN)和肌酐(creatinine，Cr)；熒光分光光度法測(cè)定腎皮質(zhì)和血清中糖基化終末產(chǎn)物(adv

3、anced glycosylation end products，AGEs)含量；可見(jiàn)光分光光度法測(cè)定抗氧化指標(biāo)的水平；DL-甘油醛-NADPH-熒光分光光度法測(cè)定醛糖還原酶(aldose reductase，AR)活性；放免法測(cè)定腎皮質(zhì)中Ⅳ型膠原和層粘蛋白含量；免疫組織化學(xué)法測(cè)定腎皮質(zhì)中基質(zhì)金屬蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2，MMP-2)、金屬蛋白酶抑制劑-2(tissue inhibitor of

4、 metalloproteinase-2，TIMP-2)、結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(connective tissue growth factor,CTGF)的表達(dá)水平；RT-PCR法測(cè)定腎皮質(zhì)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)mRNA的相對(duì)含量；光鏡和電鏡分別觀察大鼠腎臟組織形態(tài)學(xué)變化并測(cè)定基底膜厚度。 結(jié)果:中高劑量GBE能明顯改善DN大鼠多飲多尿的癥狀；有效降低空腹血糖、H

5、bAlC、24 h尿蛋白、BUN、Cr和腎臟指數(shù)；升高DN大鼠T-AOC、CAT本課題受江蘇省高校自然科研基金資助(No．03KJ13360143)活性、T-SOD和GSH-Px水平；顯著抑制DN大鼠的AR活性；降低腎皮質(zhì)和血清中AGEs含量；降低腎皮質(zhì)中Ⅳ型膠原和層粘蛋白含量；顯著降低TIMP-2和CTGF的表達(dá)以及升高M(jìn)MP-2的水平；明顯減少腎皮質(zhì)TGF-β1 mRNA的相對(duì)含量；減小DN大鼠腎臟基底膜厚度。光鏡結(jié)果顯示，GBE可

6、改善DN大鼠GBM增厚、系膜增生、PAS陽(yáng)性紅染增多，球體毛細(xì)血管閉塞等腎組織形態(tài)學(xué)上的異常。電鏡顯示，GBE使DN大鼠腎小球毛細(xì)血管基底膜平滑，厚度基本均一；系膜細(xì)胞及基質(zhì)增生程度減輕。 結(jié)論: GBE可能通過(guò)降低血糖、抑制AGEs產(chǎn)生、抗氧化應(yīng)激、降低TGF-β1水平、降低TIMP-2、CTGF和升高M(jìn)MP-2的表達(dá)，抑制AR活性，改善DN產(chǎn)生的蛋白尿、HbAlC升高、腎功能異常、腎小球系膜外基質(zhì)增生和GBM增厚等諸多變化，