銀杏葉提取物對(duì)I型糖尿病心肌病大鼠心肌線粒體凋亡途徑的影響.pdf

1、目的：
　　觀察銀杏葉提取物(extract of Ginkgo biloba，EGB)對(duì)Ⅰ型糖尿病心肌病大鼠心肌線粒體凋亡途徑及心功能的影響。
　　方法：
　　(1)離體實(shí)驗(yàn);原代分離培養(yǎng)SD大鼠乳鼠（出生1-2天）的心肌細(xì)胞，并將其隨機(jī)分為三組:分別用低糖培養(yǎng)液（LG組）、高糖培養(yǎng)液（HG組）和銀杏葉提取物干預(yù)(HG+EGB組)培養(yǎng);再用Western-blot和RT-PCR分別檢測(cè)其Bcl-2、Bax和Caspa

2、se-3的表達(dá)情況。
　　(2)在體實(shí)驗(yàn);制作動(dòng)物模型:將30只SD雄性大鼠隨機(jī)分成等量的三組:正常對(duì)照組(Con組，n=10)、糖尿病組(DM組，n=10)和銀杏葉提取物治療組(EGB組，n=10)。用鏈脲佐菌素(Strepozotocin，STZ)進(jìn)行腹腔注射建立Ⅰ型糖尿病模型，EGB組腹腔注射EGB注射液，其余2組都給予同等體積的生理鹽水。在同樣條件飼養(yǎng)后，于12周末進(jìn)行心導(dǎo)管檢測(cè)，測(cè)定相應(yīng)指標(biāo):左室發(fā)展峰壓(LVDP)、左

3、室舒張末壓(LVEDP)、左室內(nèi)壓最大上升/下降速率(LV±dp/dtmax)及左室內(nèi)壓上升最大速率所需時(shí)間(t-dp/dtmax);將實(shí)驗(yàn)大鼠斷頭處死后，分別進(jìn)行取血并且測(cè)定各組大鼠血糖、糖化血紅蛋白和胰島素的含量;并且測(cè)量體重、心臟重量、左心室重量及左心室重量指數(shù)，并用TUNEL法測(cè)定心肌細(xì)胞的凋亡指數(shù)(AI);取左室心肌用Western-blot和RT-PCR分別檢測(cè)其Bcl-2、Bax和Caspase-3的表達(dá)情況。
　　

4、結(jié)果：
　　(1)離體實(shí)驗(yàn)顯示:與LG組相比，HG組心肌細(xì)胞Bax和Caspase-3的表達(dá)、Bax/Bcl-2的比例均明顯升高，而B(niǎo)cl-2表達(dá)明顯降低;HG+EGB組與HG組相比，心肌細(xì)胞Bcl-2表達(dá)明顯增高，而B(niǎo)ax和Caspase-3的表達(dá)、Bax/Bcl-2的比例均明顯降低。
　　(2)在體實(shí)驗(yàn)顯示:①在大鼠心功能及體重測(cè)量等方面:與CON組相比，DM組大鼠左室舒張末壓(LVEDP)、左室內(nèi)壓上升最大速率所需時(shí)間

5、(t-dp/dt)、左心室重量指數(shù)、血糖濃度、糖化血紅蛋白均明顯升高，而左室發(fā)展峰壓(LVDP)、左室內(nèi)壓最大上升/下降速率(±dp/dt)、體重、左心室重量、胰島素水平均明顯降低;在EGB干預(yù)治療后，與DM組相比，大鼠左室發(fā)展峰壓(LVDP)、左室內(nèi)壓最大上升/下降速率(±dp/dt)、體重、左心室重量、胰島素水平均明顯增高，而左室舒張末壓(LVEDP)、左室內(nèi)壓上升最大速率所需時(shí)間(t-dp/dt)、左心室重量指數(shù)、血糖濃度、糖化血

6、紅蛋白均明顯降低。②在凋亡相關(guān)因子表達(dá)方面:與CON組相比，DM組心肌組織中Bax、Caspase-3的表達(dá)、Bax/Bcl-2比例均明顯升高，而B(niǎo)cl-2的表達(dá)明顯降低;在EGB干預(yù)治療后，與DM組相比，Bcl-2的表達(dá)明顯增高，而B(niǎo)ax、Caspase-3的表達(dá)、Bax/Bcl-2比例均明顯降低。但是TUNEL法測(cè)定心肌細(xì)胞凋亡率(cardiomyocyte apoptosis index，CAI)顯示并沒(méi)有明顯的差異。
　　

7、結(jié)論：
　　(1)離體實(shí)驗(yàn)顯示在銀杏葉提取物(EGB)的干預(yù)下，凋亡相關(guān)因子Bax、Caspase-3的表達(dá)以及Bax/Bcl-2的比例均降低，Bcl-2的表達(dá)增高。
　　(2)在體實(shí)驗(yàn)顯示在銀杏葉提取物(EGB)的干預(yù)下，大鼠的心功能及血糖體重等方面均明顯改善;凋亡相關(guān)因子Bax、Caspase-3的表達(dá)以及Bax/Bcl-2的比例均降低，Bcl-2的表達(dá)增高。
　　(3)在體和離體實(shí)驗(yàn)一致的結(jié)果表明，銀杏葉提取物(