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文檔簡介
1、目的:觀察銀杏葉提取物(extract of ginkgo biloba,GBE)對(duì)糖尿病性白內(nèi)障(diabetic cataract,DC)大鼠晶狀體及離體高糖培養(yǎng)的晶狀體的保護(hù)作用和可能的作用機(jī)制。
方法:1.雄性SD大鼠隨機(jī)選取8只作為正常組大鼠,其余50只一次性腹腔注射鏈脲霉素(streptozotocin,STZ)65mg/kg誘導(dǎo)糖尿病模型。成模的糖尿病大鼠再分成5組:DC模型組,GBE低、中、高劑量治療組(50m
2、g/kg、100mg/kg、200mg/kg)和芐達(dá)賴氨酸(bendazaclysine,BDL)陽性藥對(duì)照組(200mg/kg),療程12周。
2.M199培養(yǎng)液培養(yǎng)大鼠晶狀體組織,將其分為正常對(duì)照組(NS組,葡萄糖終濃度2.40mmol/L);高糖組(HG組,葡萄糖終濃度52.35mmol/L);GBE低、中、高劑量組(10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml)和BDL組(0.5μmol/L),培養(yǎng)5d后收集晶狀體組
3、織。
3.裂隙燈觀察大鼠晶狀體變化并對(duì)其混濁度進(jìn)行分級(jí);NIH Image J圖像處理軟件計(jì)算離體培養(yǎng)晶狀體圖像灰度值,對(duì)晶狀體混濁程度進(jìn)行分析;ELISA法測(cè)定晶狀體中糖基化終末產(chǎn)物(advanced glycosylation end products,AGEs)含量:可見光分光光度法測(cè)定過氧化氫酶(catalase,CAT),谷胱甘肽(glutathione,GSH)和總超氧化物歧化酶(total superoxide
4、dismutase,T-SOD)三種抗氧化指標(biāo)的水平;熒光分光光度法測(cè)定醛糖還原酶(aldose reductase,AR)活性;免疫印跡法測(cè)定AR相對(duì)表達(dá)水平。
結(jié)果:1.在整體動(dòng)物模型上,NS組大鼠晶狀體清亮、透明,DC組大鼠晶狀體明顯混濁。與DC組相比,GBE中高劑量組大鼠晶狀體混濁程度明顯減輕。與NS組比較,DC模型組CAT、GSH、T-SOD酶活力明顯降低(P<0.01);GBE中高劑量組的晶狀體CAT、T-SOD和
5、GSH酶活力與DC組比較有明顯增強(qiáng)(P<0.05或P<0.01)。DC大鼠的AR表達(dá)水平明顯高于正常大鼠(P<0.01);與DC組比較,GBE中高劑量治療組的AR表達(dá)降低(P<0.01)。與NS組相比,DC組大鼠晶狀體中的AGEs相對(duì)含量明顯升高(P<0.01),給予高劑量GBE治療的大鼠晶狀體AGEs含量有所下降(P<0.05)。
2.在離體培養(yǎng)的晶狀體組織上,高糖培養(yǎng)的晶狀體與NS組相比混濁度明顯增高(P<0.01),GB
6、E中高劑量組與HG組相比,晶狀體混濁度有所減輕(P<0.01)。與NS組比較,HG組晶狀體組織中CAT、GSH、T-SOD等抗氧化酶活力明顯降低(P<0.01);GBE中高劑量組的大鼠CAT、T-SOD和GSH酶活力相較DC組有明顯增強(qiáng)(P<0.05或P<0.01)。與NS組比較,HG組晶狀體AR的活力和表達(dá)水平顯著升高(P<0.01);高劑量的GBE則可使AR的活力和表達(dá)水平降低(P<0.01)。與NS組比較,HG組晶狀體中的AGEs
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