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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:以大鼠尾椎間盤穿刺法建立椎間盤退變動(dòng)物模型,并通過組織學(xué)及免疫組化實(shí)驗(yàn)觀察椎間盤組織中髓核細(xì)胞的數(shù)量、形態(tài)及Ⅱ型膠原含量的變化,驗(yàn)證該動(dòng)物模型的可行性,為進(jìn)一步研究提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
方法: SD清潔級(jí)雄性大鼠24只,隨機(jī)分為1、2、4周模型組和對(duì)照組,每組各6只。10%水合氯醛3ml/kg腹腔注射麻醉,X線定位后以20G穿刺針腹背貫通穿刺模型組大鼠第7/8尾椎間盤(Co7/8)。術(shù)后1、2、4周分別將該模型組大鼠處死,
2、取Co7/8椎間盤組織,行HE染色和Ⅱ型膠原免疫組化實(shí)驗(yàn),與對(duì)照組大鼠比較。觀察髓核細(xì)胞數(shù)量、形態(tài)及纖維環(huán)排列的變化,免疫組化實(shí)驗(yàn)結(jié)果以圖像分析軟件Image-Pro Plus6.0計(jì)算灰度值,觀察髓核組織中Ⅱ型膠原含量的變化。
結(jié)果: HE染色觀察可見對(duì)照組髓核組織完整,有大量髓核細(xì)胞,纖維環(huán)排列規(guī)則;造模后的第1、2、4周髓核逐漸縮小,髓核細(xì)胞數(shù)量不斷減少,纖維軟骨細(xì)胞數(shù)量逐漸增多,纖維環(huán)排列紊亂。
免疫
3、組化實(shí)驗(yàn)顯示對(duì)照組髓核組織問質(zhì)呈強(qiáng)陽性染色,而各模型組呈弱陽性染色。對(duì)照組及1、2、4周模型組免疫組化染色的灰度值分別為138.16±1.56、141.61±1.40、145.37±1.36和149.76±1.16。單因素方差分析結(jié)果:F=78.33,P<0.01。組間比較采用SNK法,均有顯著差異。
結(jié)論:大鼠尾椎問盤穿刺法可以誘導(dǎo)椎問盤退變,比較真實(shí)地模擬了椎間盤退變的過程。模型制作經(jīng)濟(jì),效果可靠,重復(fù)性好,可為椎間盤
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