NF-κBp65、IκBα和COX-2在喉鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、目的：喉鱗狀細(xì)胞癌是耳鼻咽喉最常見(jiàn)惡性腫瘤之一。近年來(lái)發(fā)病率不斷升高而常規(guī)治療未能提高其生存率。從基因水平探索腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移的機(jī)制以及治療是目前的研究熱點(diǎn)。細(xì)胞核因子κB(NF-κB)是一種廣泛存在于細(xì)胞中的具有多向性調(diào)節(jié)作用的蛋白質(zhì)分子，它參與許多基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控及細(xì)胞的凋亡調(diào)控和轉(zhuǎn)化，在許多惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中起著重要的作用。NF-κB的活性受到其抑制蛋白(IκB)的抑制。 大量研究證實(shí)COX-2在多種腫瘤中均有高表

2、達(dá)，對(duì)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展起重要作用，而其高表達(dá)與NF-κB的持續(xù)活化密切相關(guān)。已有研究證實(shí)，NF-κB正是通過(guò)與COX-2基因啟動(dòng)子區(qū)域特異的DNA序列相結(jié)合，從而上調(diào)COX-2的表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)血管增生，增強(qiáng)了腫瘤的侵襲性和轉(zhuǎn)移。 本研究采用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)了NF-κBp65、IκBα和COX-2在喉鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)，旨在探討這三種物質(zhì)在喉鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移中的意義及內(nèi)在相關(guān)性，為臨床防治提供新的思路和理論依據(jù)

3、。 方法：采用2004年1月-2005年11月，于河北醫(yī)科大學(xué)附屬第四醫(yī)院耳鼻喉-頭頸外科住院手術(shù)治療的原發(fā)喉鱗狀細(xì)胞癌患者50例，切取手術(shù)切除的新鮮癌組織及相應(yīng)癌旁組織(距腫瘤邊緣均≥0.5cm)。同期采集非喉部疾病患者的正常喉粘膜組織20例。所有組織取材后即用70％酒精固定，4℃冷藏保存。應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)進(jìn)行NF-κBp65、IκBα和COX-2表達(dá)的蛋白定量分析，以熒光指數(shù)(FI)表示三種蛋白表達(dá)的相對(duì)含量。以FI

4、值大于正常組織細(xì)胞的-xFI±2S為陽(yáng)性，否則為陰性。所有數(shù)據(jù)經(jīng)Excell數(shù)據(jù)庫(kù)整理，應(yīng)用SAS6.12統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。以P≤0.05為差異在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著性意義，P≤0.01為差異在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有非常顯著性意義。 結(jié)果 1NF-κBp65蛋白在喉鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)量(FI=1.2)明顯高于癌旁組織(FI=1.03)和正常粘膜組織(FI=1.00)(P＜0.05)，喉鱗狀細(xì)胞癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率(88％)也高

5、于癌旁組織(12％)(χ2=57.76，P=0.001)和正常粘膜(0％)(χ2=47.39，P=0.001)癌旁組織和正常喉粘膜組織間的表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 喉鱗狀細(xì)胞癌組織中，NF-κBp65在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(N+)的表達(dá)量(FI=1.26)明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(N0)(FI=1.17)。陽(yáng)性表達(dá)率兩組無(wú)明顯差異(N+93.8％，N085.3％)；NF-κBp65在不同臨床分期、臨床分型、性別、年齡中的表達(dá)量和陽(yáng)性表達(dá)率均

6、無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 2IκBα在喉鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)量(FI=0.83)及陽(yáng)性表達(dá)率(52％)明顯低于癌旁組織(FI=0.98，92％)和正常喉粘膜組織(FI=1.00，95％)，(P＞0.05)(χ2=19.84，P=0.001)(x2=11.5，P=0.001)；癌旁組織和正常喉粘膜組織間的表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 喉鱗狀細(xì)胞癌組織中，IκBα在N+組的表達(dá)量(FI=0.78)和陽(yáng)性表達(dá)率(0％)均明顯低于N0組(FI

7、=0.86，76.5％)；臨床Ⅲ、Ⅳ期組的表達(dá)量和陽(yáng)性表達(dá)率(FI=0.8，20％)明顯低于Ⅰ、Ⅱ期組(FI=0.85，73.3％)；IκBα在不同臨床分型、性別、年齡中的表達(dá)量和陽(yáng)性表達(dá)率均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 3COX-2在喉鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)量(FI=1.26)及陽(yáng)性表達(dá)率(88％)明顯高于癌旁組織(1.04，10％)和正常喉粘膜組織(1.00，0％)，(P＞0.05)(χ2=71.01，P=0.001)(P=0.00)(χ

8、2=47.385，P=0.001)；癌旁組織和正常喉粘膜組織間的表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 喉鱗狀細(xì)胞癌組織中，COX-2在N+組的表達(dá)量(FI=1.31)高于N0組(FI=1.24)，N+組和N0組陽(yáng)性表達(dá)率(100％，82.4％)無(wú)明顯差異。COX-2在不同臨床分期、臨床分型、性別、年齡中的表達(dá)量和陽(yáng)性表達(dá)率均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。4以NF-κBp65和IκBα的表達(dá)為自變量，COX-2的表達(dá)為因變量，進(jìn)行多元線性回歸分析，示三者間表達(dá)

9、無(wú)相關(guān)。 結(jié)論 1NF-κBp65、IκBα和COX-2在喉鱗狀細(xì)胞癌組織、癌旁組織及正常喉粘膜組織中均有表達(dá)。 2NF-κBp65和COX-2在喉鱗狀細(xì)胞癌組織中的定量及定性表達(dá)均高于癌旁組織和正常喉粘膜組織，癌旁組織和正常喉粘膜組織的表達(dá)無(wú)差別。 3NF-κBp65和COX-2在喉鱗狀細(xì)胞癌組織中的定量表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中的表達(dá)均高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組，定性表達(dá)在兩組間均無(wú)差別；兩者定

10、量及定性表達(dá)與臨床分期、臨床分型、患者年齡及性別均無(wú)關(guān)。 4IκBα在喉鱗狀細(xì)胞癌組織中的定量及定性表達(dá)均明顯低于癌旁組織和正常喉粘膜組織，癌旁組織和正常喉粘膜組織的表達(dá)無(wú)差別。 5IκBα在喉鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期有關(guān)，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組和臨床Ⅲ、Ⅳ期組的定量及定性表達(dá)分別明顯低于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組和臨床Ⅰ、Ⅱ期組；但其表達(dá)與臨床分型、年齡及性別無(wú)關(guān)。 6NF-κBp65、IκBα和COX-2三者間