大蒜素產(chǎn)率提高的酶調(diào)控技術(shù)研究.pdf

1、大蒜為百合科蔥屬多年生草本植物，含有豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)且具有抗腫瘤、保護(hù)心血管系統(tǒng)、降低血糖等功效。大蒜之所以具有廣泛的藥理作用，原因在于大蒜含有的生物活性物質(zhì)－含硫化合物。大蒜破碎后蒜氨酸(S－烯丙基－L－半胱氨酸)在蒜氨酸酶(EC4.4.1.4)催化作用下生成大蒜素，大蒜素生成產(chǎn)率與蒜氨酸酶的活性調(diào)控有密切聯(lián)系，因此首先圍繞大蒜蒜氨酸酶的酶學(xué)性質(zhì)展開研究具有十分重要的現(xiàn)實(shí)意義。本試驗(yàn)以大蒜鱗莖為原料，經(jīng)PEG8000沉淀法、ConA-S

2、epharose親和層析柱法分離純化出蒜氨酸酶用于性質(zhì)的研究。研究不同金屬離子、甘油、L-半胱氨酸、磷酸吡哆醛等對(duì)蒜氨酸酶活性的影響，采用HPLC法定量研究了破碎大蒜體系中蒜氨酸轉(zhuǎn)化率，確定了提高蒜氨酸轉(zhuǎn)化率的因素，同時(shí)研究了有利于提高蒜氨酸轉(zhuǎn)化率的因素對(duì)于大蒜素產(chǎn)率提高程度的研究。主要試驗(yàn)結(jié)果如下： 1、蒜氨酸酶活性的影響因素分析研究表明大多數(shù)金屬離子對(duì)蒜氨酸酶活性有影響，其中Mg2+、Fe3+、Ca2+、Fe2+、Mn2+對(duì)

3、蒜氨酸酶有明顯的激活作用，其中Mn2+的激活作用最顯著，10mmol/LMn2+可以將蒜氨酸酶的活性提高2.84倍。金屬離子對(duì)蒜氨酸酶的激活作用在有甘油、葡萄糖、蔗糖等多羥基化合物存在的條件下效果更好。Cu2+對(duì)蒜氨酸酶有抑制作用。醋酸酐、L-半胱氨酸對(duì)蒜氨酸酶有抑制作用，輔酶磷酸吡哆醛能提高蒜氨酸酶的活性。 2、大蒜破碎體系中蒜氨酸轉(zhuǎn)化率研究采用微波滅酶、水煮滅酶、有機(jī)溶劑冷凍滅酶三種方法對(duì)大蒜中蒜氨酸進(jìn)行提取。蒜氨酸的保留時(shí)

4、間為3.717min，測(cè)得蒜氨酸的含量為：0.823％、0.730％、0.156％。同時(shí)對(duì)大蒜破碎放置一天后體系中蒜氨酸的含量進(jìn)行了分析，測(cè)得蒜氨酸轉(zhuǎn)化率僅為77.0％。通過(guò)向破碎的大蒜體系中添加5mmol/L磷酸吡哆醛可以將蒜氨酸的轉(zhuǎn)化率由76.5％提高到87.5％(30min后測(cè)定)，0.1mmol/L的Mn2+可以將蒜氨酸的轉(zhuǎn)化率提高33.3％。本法達(dá)到較高的精密度(0.83％)和回收率(97.6％)，適用于大蒜中蒜氨酸含量的測(cè)定